[发明专利]一种基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法，其特征在于：包含以下步骤：

步骤1：选取正常受孕的大鼠，在孕9-20天的时间段，每日给予0.1～2.0mg/kg地塞米松皮下处理，孕鼠自由饮食；

步骤2：上述步骤1的给予地塞米松后的孕鼠自然生产，获得F1子代，留取窝仔数≥10只的孕鼠，每只孕鼠的仔数保留10只，雌雄各半，母鼠母乳喂养4周后断奶，然后正常饮食喂养；

步骤3：从上述步骤2的F1子代中选取1只12周龄雌鼠与正常12周龄雄性大鼠按雌雄2:1比例合笼，正常喂养至自然分娩产生F2子代；

步骤4：依照步骤3中的方法，建立并获取F3、……、Fn子代大鼠；

步骤5：对所述F1、F2、F3、Fn子代大鼠膝关节软骨进行软骨质量相关指标检测，软骨质量相关指标发生改变，则所述F1-Fn子代均为基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型。

2.如权利要求1所述的基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法，其特征在于：n为4到7的自然数。

3.如权利要求2所述的基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法，其特征在于：n等于5。

4.如权利要求1或2或3所述的基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法，其特征在于：步骤5中，所述软骨质量相关指标发生改变具体是指，关节软骨H&E染色呈现软骨层表面粗糙、细胞排列较为紊乱，番红O染色呈软骨染色变浅，软骨基质相关蛋白与mRNA表达均降低。

5.如权利要求4所述的基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法，其特征在于：所述软骨基质相关蛋白与mRNA表达包括COL2A1、ACAN、TGFβ、TGFβR1、SMAD2、SMAD3和SOX9。

6.如权利要求1所述的基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法，其特征在于：所述大鼠为SPF级Wistar或SD大鼠。

7.一种权利要求1所述的基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型的构建方法构建的动物模型在探究表观遗传学机制、骨关节致损因素筛选、骨关节炎防治药物筛选中的应用。

8.如权利要求7所述的动物模型的应用，其特征在于：在探究表观遗传学机制应用中，通过所述基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型确定TGFβ信号通路及其表观遗传修饰改变是胎源性成年骨关节炎发生的机制。

9.如权利要求7所述的动物模型的应用，其特征在于：在骨关节致损因素筛选应用中，通过所述基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型确定木瓜蛋白酶对其具有显著的促骨关节炎形成作用。

10.如权利要求7所述的动物模型的应用，其特征在于：在骨关节炎防治药物筛选应用中，通过所述基于表观遗传修饰的低质量关节软骨动物模型确定氨基葡萄糖能够显著改善其软骨质量。