[发明专利]一种昆虫细胞培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种昆虫细胞培养基，其特征在于，其有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠；

所述功能添加剂各组分的浓度为：腐胺0.15~0.6mg/L、抗坏血酸磷酸酯镁0.5~3mg/L、乙醇胺3.5~10.0mg/L、次黄嘌呤3.5~10.5mg/L、酵母提取物3000~8000mg/L、棉籽水解物1000~3000mg/L、丙酸钠90~900mg/L、泊洛沙姆188 1000~2500mg/L、柠檬酸铁50~150mg/L、柠檬酸钠70~200mg/L、丙酮酸钠600~1800mg/L；

所述氨基酸的组成及各组分含量包括，甘氨酸 250~650 mg/L 、丙氨酸 150~370 mg/L、精氨酸盐酸盐400~885 mg/L、天冬酰胺150~600 mg/L、天冬氨酸150~600 mg/L、半胱氨酸20~75 mg/L、谷氨酸200~600 mg/L、谷氨酰胺 300~800 mg/L、组氨酸1500~3500 mg/L、异亮氨酸 20~75 mg/L、亮氨酸50~150 mg/L、赖氨酸盐酸盐350~850 mg/L、蛋氨酸25~75 mg/L、苯丙氨酸100~175 mg/L、脯氨酸250~400 mg/L、丝氨酸450~600 mg/L、苏氨酸100~250 mg/L、色氨酸 50~150 mg/L、酪氨酸二钠盐30~80 mg/L、缬氨酸 70~150 mg/L、β-丙氨酸150~300 mg/L；

所述维生素的组成及各组分含量包括，维生素H 0.02~0.08 mg/L、D-泛酸钙0.3~1.0mg/L、叶酸 0.03~0.1 mg/L、烟酸0.03~0.1 mg/L、对氨基苯酸0.03~0.1 mg/L、、维生素B60.03~0.1 mg/L、维生素B2 0.03~0.1 mg/L、维生素B1 0.03~0.1 mg/L、i-肌醇 0.03~0.1mg/L、硫辛酸 0.2~0.6 mg/L、维生素B12 0.03~0.1 mg/L、烟酰胺 0.03~0.1 mg/L、维生素C0.03~0.1 mg/L、维生素E 0.025~0.08mg/L、氯化胆碱 0.3~1.0mg/L；

所述无机盐的组成及各组分含量包括，KCl 1500~3000 mg/L、NaHCO₃ 200~600 mg/L、MgCl₂ 800~1500 mg/L、MgSO₄ 600~1800mg/L、CaCl₂ 200~800 mg/L、NaH₂PO₄ 500~1500 mg/L；

所述碳源的组成及各组分含量包括，海藻糖 50~150 mg/L、蔗糖10000~35000 mg/L、琥珀酸500~1000 mg/L、富马酸25~80 mg/L、果糖200~800 mg/L、D-葡萄糖200~1000 mg/L 、α-酮戊二酸200~800 mg/L；

所述脂类物质的组成及各组分含量包括，亚麻酸 0.03~0.1 mg/L、孕酮 0.03~0.1 mg/L、亚油酸0.04~0.24 mg/L、胆固醇 2~7.5 mg/L、花生四烯酸0.001~0.008 mg/L。

2.一种如权利要求1所述的昆虫细胞培养基的制备方法，其特征在于，包括按照各组分的用量称取各组分加入水中定容混合搅拌均匀后，依次调节pH、渗透压，除菌后即得所述的培养基。

3.如权利要求2所述的昆虫细胞培养基的制备方法，其特征在于，采用5N的NaOH调节pH至6.2；用KOH调节渗透压至355~385 mOsm/L；用0.22 μM的过滤膜除菌。

4.如权利要求3所述的昆虫细胞培养基的制备方法，其特征在于，还包括首先将氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂按照其成分组成和含量分别配置成浓缩液；其中氨基酸配置成10倍浓缩液、维生素配置成200倍浓缩液、脂类物质配置成100倍浓缩液、碳源、无机盐和功能添加剂分别配置成1倍溶液。