[发明专利]利用玉米皮水解产物制备苏氨酸发酵培养基的工艺

权利要求书

1.利用玉米皮水解产物制备苏氨酸发酵培养基的工艺，其包括如下步骤：

步骤1）取发酵培养基原料：蔗糖，葡萄糖，玉米皮水解产物，硫酸铵，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，七水硫酸镁，七水硫酸亚铁，一水硫酸锰，V_B1，V_H ；

步骤2）将各原料搅拌均匀后，调节pH为6-7，灭菌，自然冷却，即得发酵培养基。

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述工艺包括如下步骤：

步骤1）取发酵培养基原料，按照以下浓度配制：蔗糖60g/L，葡萄糖10g/L，玉米皮水解产物300ml/L，硫酸铵5g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，七水硫酸镁0.1g/L，七水硫酸亚铁 10mg/L，一水硫酸锰10mg/L，V_B1 2mg/L，V_H 50μg/L；

步骤2）将各原料搅拌均匀后，调节pH为7，灭菌，自然冷却，即得发酵培养基。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述玉米皮水解产物按照如下步骤制备而得：步骤1）玉米皮预处理，步骤2）超声辅助盐酸水解，步骤3）微生物水解，步骤4）水解菌体，步骤5）浓缩和蒸汽处理。

4.根据权利要求3所述的工艺，其特征在于，所述玉米皮水解产物按照如下步骤制备而得：

步骤1）玉米皮预处理：将玉米皮经水洗2遍，干燥，粉碎过50-100目筛，再采用无水乙醚进行脱脂，得到预处理的玉米皮；

步骤2）超声辅助盐酸水解：将预处理的玉米皮添加到0.4-0.6M的稀盐酸中，添加量为1g：3-10ml，超声波处理，然后升温至80-90℃，静置2-5h，降温至55℃，再滴加氨水，控制在pH为6.5-7.0；

步骤3）微生物水解：按照2-5%的接种量接入耐热芽孢杆菌种子液，培养36-48h，然后按照2-5%的接种量接入热纤梭菌种子液，继续培养96h，高速碟片离心机离心，收集沉淀物和上层液体；

步骤4）水解菌体：将沉淀物按照1g：3-10ml的比例添加浓度为0.5-0.8M的盐酸溶液，在100℃下微波辅助水解，然后添加中性蛋白酶进行水解12-24h，水解完成后，用过滤网过滤去除不溶物，收集上清液；

步骤5）浓缩和蒸汽处理：将上层液体和上清液按照2-4:1的体积比混合，蒸发浓缩至三分之一，然后121℃蒸汽处理5-20min，自然冷却至室温，即得水解产物。

5.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述超声波处理的条件为：超声时间为6s，间隔时间为3s，超声总时间为180-270s，超声波频率为20-25kHz。

6.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述高速碟片离心机离心的条件为：以4000-5000rpm离心3-5min。

7.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述微波辅助水解的参数为：时间为1h，微波功率为440 W。

8.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述中性蛋白酶的水解参数为：水解时间为12-24h，水解温度为40℃，pH为7.5，加酶量为400U/ml。

9.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述过滤网的孔径为50-100目。

10.按照权利要求1-9所述的工艺制备的发酵培养基。