[发明专利]梨组织培养幼苗生根及驯化方法

权利要求书

1.一种梨组织培养幼苗生根及驯化方法,其特征在于：该方法包括以下步骤：

1)生根培养；

1.1)在继代4周后，选择生长势健壮的组培苗，切除植株下部愈伤组织和多余的叶片，保留植株上半部约2～3cm，移入培养基中；

1.2)每瓶2～3株，放置培养间中进行4d暗培养，培养温度为25±2℃，之后进行光照培养，光源为日光灯，光照强度2000lx，光周期16h；

2)开盖驯化；

进行生根培养的组培苗在一周左右开始出现生根，约40d左右组培苗生根完成；驯化时先将瓶盖拧松，一天后将瓶盖打开三分之一，三天后将瓶盖打开二分之一；

3)水培驯化：开盖驯化7d后，进行水培驯化；

4)基质移栽：待幼苗长至5cm以上，将其移栽到基质中。

2.根据权利要求1所述的梨组织培养幼苗生根及驯化方法，其特征在于：所述步骤3)的具体步骤如下：

3.1)首先选取质地紧密的泡沫板，裁剪至可以漂浮在水培盆中，在泡沫板上用打孔器打出直径约为3cm的圆孔；

3.2)将生根苗从瓶中取出，轻轻洗去培养基，去除黄化的叶子，用圆柱形海绵固定好苗子放至泡沫板的小孔中，确保植株根系可以完全舒展在营养液中，植株根系直接接触营养液可以促进养分吸收；

3.3)水培移栽过程中要注意保持空气湿度，防止叶片萎蔫；全部移栽完成后，在透明罩内喷水，用透明罩将水培盆完全罩住，保持湿度为90％以上，放至培养间，培养温度为25±2℃，光照强度2000lx，光周期16h；

3.4)待幼苗顶端有新芽长出，将营养液浓度调整为二分之一浓度，并逐步降低空气湿度，直至保湿罩完全摘除，植株完全适应自然环境。

3.根据权利要求2所述的梨组织培养幼苗生根及驯化方法，其特征在于：所述步骤3.3)中培养期间每隔半小时通氧一小时，为防止根系腐烂，水培营养液15d更换一次，以保持养分充足。

4.根据权利要求3所述的梨组织培养幼苗生根及驯化方法，其特征在于：所述步骤4)的具体步骤如下：

4.1)按照进口基质：蛭石：珍珠岩＝6:1:1配置，用水拌匀，达到手握成团，松手散开的状态即可；

4.2)在阴凉的环境中，将幼苗从营养液移至基质中，种植时，保证植株根系舒展在基质中，清理干净叶片、生长点等部位残留的基质；

4.3)种植完成后，用二分之一浓度营养液浇灌，每两天浇一次，直至新的顶芽萌发，之后逐步减少营养液浇灌次数。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的梨组织培养幼苗生根及驯化方法，其特征在于：所述步骤1.1)中生长势健壮的组培苗为高度3cm或以上，茎粗0.4mm以上，叶片浓绿，生长点无坏死，叶片无萎蔫的组培苗。

6.根据权利要求5所述的梨组织培养幼苗生根及驯化方法，其特征在于：所述步骤1.2)中要根据不同品种，选用适宜的生长素浓度和组合进行培养，适宜的生长素可以促进植株生根；每瓶2～3株，放置培养间中进行4d暗培养，培养温度为25±2℃，之后进行光照培养，光源为日光灯，光照强度2000lx，光周期16h。

7.根据权利要求6所述的梨组织培养幼苗生根及驯化方法，其特征在于：所述步骤1.2)中以梨属植物库尔勒为例，适宜培养基配方为：1/2MS+1.5mg/L、IAA+0.5mg/L、IBA+20g/L、蔗糖+7g/L、琼脂，PH＝5.8。