[发明专利]一种判断女性原发不孕的标记CDC20基因及其检测试剂盒

说明书

本发明属于基因检测技术领域，具体为一种判断女性原发不孕的标记及其检测试剂盒。本发明涉及的标记为人类CDC20基因，它的突变是导致因卵子不成熟、受精及胚胎异常致女性不孕的原因。本发明还提供检测CDC20基因是否发生突变的的引物：SEQ ID NO.2‑SEQ ID NO.17；以及检测CDC20基因发生突变筛查试剂盒。本发明可用于指导临床相应患者是否合适进行试管婴儿术。

技术领域

本发明属于基因检测技术领域，具体涉及一种检测女性原发不孕的标记及其检测试剂盒。

背景技术

正常怀孕及生殖是维持及延续人类种群的重要环节。对于女性不孕，目前已经有ZP-1，Stag3，FSHR等基因被发现与女性不孕症密切相关（Huang HL et al, Mutant ZP1 infamilial infertility. N Engl J Med. 2014 370(13):1220-6;de Roux N et al, Afamily with hypogonadotropic hypogonadism and mutations in the gonadotropin-releasing hormone receptor. N Engl J Med. 1997 337(22):1597-602;Caburet S etal, Mutant cohesion in premature ovarian failure. N Engl J Med.2014 370(10):943-9）。但是，均未在临床中应用。

导致女性不孕症的原因很多，有一些临床报道涉及以卵子不成熟为特征的女性不孕症的描述（Rudak et al, fertility and sterility,1990 54:292-296;HumanReproduction,1995 10:2343-2349; fertility and sterility 1999 71:567-570;HumanReproduction 2001 16(10):2136-2138;Human Reproduction 2002 17(6):1604-1609;Human Reproduction 2002 17(10):2556-2559）。这些病人通过反复进行受精-胚胎移植术（试管婴儿），均因未能获取到成熟卵细胞，而无法完成成功的体外受精操作。如果能发现相关致病基因，则对疾病临床诊断及分型都具有重要意义。最近我们发现了导致人类卵子成熟障碍的第一个致病基因TUBB8(N Engl J Med. 2016 Jan 21;374(3):223-32)。但是，此基因仅能解释部分患者的原因，相当多患者的原因依然未知。

经对现有技术文献的检索发现，仅发现少数几篇围绕CDC20基因功能的研究文章。这些研究报道了此基因在小鼠卵子减数分裂过程中起着重要作用，敲除导致雌鼠不孕。但是，至今未见关于CDC20基因突变与人类疾病之间关系的任何报道。也未发现其与女性不孕症相关的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作方便、效果明确的用于判断女性原发不孕的标记及其检测试剂盒。

本发明中，用于检测女性原发不孕的CDC20基因，其核酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述女性原发不孕是指因卵子不成熟、受精及胚胎异常导致的女性不孕。

本发明还涉及筛查因卵子不成熟、受精及胚胎异常致原发性不孕的方法，就是通过检测CDC20基因是否发生突变来判断病人是否为卵子不成熟、受精及胚胎异常而导致的原发性不孕。患者携带CDC20基因突变表现为不孕，表现为卵子始终无法成熟、受精及胚胎异常、试管婴儿失败。

可见，CDC20基因是否发生突变可作为判断因卵子不成熟、受精及胚胎异常致女性不孕的标记。

检测CDC20基因是否发生突变方法，具体可从患者的外周血中提取DNA后，用PCR（多聚酶链式反应）法结合DNA测序，来检测CDC20基因是否发生了突变。

其中，检测的样本是DNA，该DNA样本来自于待检人群的外周血。