[发明专利]一种琉璃苣启动子及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，提供了一种琉璃苣启动子，并提供了包含上述启动子的基因表达盒、载体、受体和转基因植物。可用于将目的基因通过载体转染至相应受体和/或植物中。本发明提供的琉璃苣启动子能够在宿主植物中表达酶、结构蛋白等多种类型蛋白基因。

技术领域

本发明属于基因工程领域，涉及一种琉璃苣启动子及应用。

背景技术

启动子是一段供RNA聚合酶定位用的DNA序列，通常位于基因的上游。一旦RNA聚合酶定位并结合在启动子上即可启动转录过程，因此启动子是基因表达调控的重要顺式元件，启动子调控模式的实质就是与RNA聚合酶以及其他蛋白辅助因子等反式元件的相互作用。在基因工程技术蓬勃发展的今天，构建一种能够高水平表达异源蛋白质的表达载体，除了要具备克隆载体的一般要求之外，最重要的是必须带有能够控制外源插入的DNA片段进行有效转录和转译的DNA序列，即启动子结构。启动子作为基因工程表达载体的一个重要元件，对外源基因的表达水平影响很大。启动子与受体细胞之间的合理匹配对异源基因在宿主细胞中的表达起着重要的作用；同时出于高水平表达的要求，这种启动子最好是强启动子，并具有良好的调节控制系统。弄清启动子的分子本质才有可能找到提高克隆基因表达效率的有效途径。

琉璃苣（Borago officinalis L.）为紫草科（Boraginaceae）琉璃苣属（Borago）一年生草本植物，其种子油脂含量丰富，具有脂肪酸组成特殊、不饱和脂肪酸含量高、含有生物活性物质等特点，对人体的新陈代谢有较好的调节作用。目前，对琉璃苣中启动子的研究还没有报道。

发明内容

针对目前缺乏琉璃苣启动子对基因调控的作用，本发明提供一种琉璃苣启动子及其应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种琉璃苣启动子，其核酸序列如SEQ ID NO: 1所示。

一种包含上述启动子的基因表达盒。所述基因表达盒包括启动子、目的基因、终止子。所述目的基因的来源可以是植物、动物或微生物。

一种包含上述启动子的载体。所述载体是指能转移到受体中并能够自我复制的DNA分子，如细菌质粒、噬菌体和动植物病毒等。

一种包含上述启动子的受体。所述受体是指具有接受外源DNA的能力的细胞，如大肠杆菌、酵母菌、动植物细胞系等。

一种包含上述启动子、基因表达盒、载体或受体的转基因植物。所述转基因植物包括单子叶植物或双子叶植物。

本发明具有以下优点：

本发明提供的琉璃苣启动子能够在宿主植物中表达酶、结构蛋白等多种类型蛋白基因；而且可以通过对其中不同元件的删除、增加等基因工程的操作实现外界环境因素对Δ-6脂肪酸脱氢酶基因及其他基因的调控。

附图说明

图1为实施例1中PCR产物1%琼脂糖凝胶电泳图；

图2为启动子元件进行预测分析；

图3为检测阳性转化子PCR产物的1%琼脂糖凝胶电泳图；

图4为拟南芥转化株系的筛选PCR产物的1%琼脂糖凝胶电泳图；

图5为野生型拟南芥和转基因拟南芥的GUS分析。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。

实施例1 启动子和克隆与元件分析

剪取健康的琉璃苣叶片，置于液氮中研磨，采用CTAB法提取基因组DNA。根据已知Δ-6脂肪酸脱氢酶基因启动子的序列设计合成用于PCR扩增的一对引物：