[发明专利]黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制药中的应用及其制备方法

说明书

本发明公开了黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制药中的应用及其制备方法，本发明发现黄褐毛忍冬水提取物、30％醇提取物、60％醇提取物和95％醇提取物对丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶具有较强的抑制作用，可用于制备治疗丙型肝炎的药物。

技术领域

本发明涉及中药技术领域，特别是涉及黄褐毛忍冬药材不同溶剂提取物在制备治疗丙型肝炎药物中的应用及不同溶剂提取物的制备方法。

技术背景

人体感染丙型肝炎病毒所致的丙型肝炎，已成为全球最棘手的健康问题,目前全世界已有1.7亿人感染。若无药物的治疗,长期感染丙型肝炎病毒将发展成为慢性肝炎、肝坏死、肝癌等疾病。当前最有效的治疗方法是聚乙二醇干扰素联合利津巴韦，该方法对于广大发展中国家普遍存在的I型丙型肝炎治疗有效率低于50％,长期使用干扰素存在许多副作用，如：白细胞、血小板、嗜中性白血球的减少和抑郁症等；长期使用利津巴韦，也将产生溶血性贫血等副作用，使得患者不能持续治疗，因此发展独特、有效、更安全的丙型肝炎治疗药物尤为紧迫。

丙型肝炎病毒蛋白酶NS3/4A在病毒圆熟过程中起着重要的作用，已被证实是发现丙型肝炎药物的有效靶点之一。目前三种丙型肝炎NS3/4A蛋白酶抑制剂，BILN 2061,VX-950和SCH 503034，已被临床证实疗效显著，但多为肽类抑制剂，合成困难，并有一定的毒副作用。

黄褐毛忍冬系忍冬科植物(Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng)的干燥花蕾或带初开的花，具有清热解毒，疏散风热的功效，主治温病发热、热毒血痢、痈肿疔疮、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等多种感染性疾病。该植物主要分布于中国广西西北部、贵州西南部和云南。生长在海拔850-1300米的山坡岩旁灌木林或林中。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有治疗丙型肝炎的药物合成困难、副作用多的缺陷，提供有抑制丙型肝炎蛋白酶作用的黄褐毛忍冬药材不同溶剂提取物的制备方法及该提取物在制药上的新用途。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：

本发明提供黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制备治疗丙型肝炎药物中的应用。

其中，前述黄褐毛忍冬为忍冬科植物Lonicera fulvotomentosa Hsu etS.C.Cheng干燥花蕾或带初开的花原药材。

进一步的，前述的不同溶剂包括水、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷中的一种或两种以上混合溶剂。

本发明还提供了黄褐毛忍冬不同极性溶剂提取物的制备方法，包括如下步骤：黄褐毛忍冬植物花蕾，粉碎，取25克药材，分别加200毫升水、30％甲醇、60％甲醇、95％甲醇，超声2分钟后，加热回流提取3次，第一次回流提取2小时，第二、三次回流1小时，合并提取液，减压浓缩成浸膏，真空干燥，得黄褐毛忍冬水提取、30％醇提物、60％醇提物和95％的醇提物

本发明对黄褐毛忍冬不同极性溶剂提取物的体外抗丙型肝炎活性进行了测试，具体如下；

测试原理：荧光法

检测仪器：Synergy II

试剂盒:520HCV蛋白酶试剂盒(批号：AS71145-1035，美国圣何塞AnaSpec。)

蛋白酶：HCV NS3/4A蛋白酶(批号：AS-61017-10)，美国圣何塞AnaSpec)

Embelin(Sigma-Aldrich,Lot#:022M4726V)

测试溶液的配制(按试剂盒说明手册操作)：

缓冲溶液：将2X实验缓冲液(Component D)、1M DDT(Component F)和去离子水按1：0.06：1进行混合，冰浴备用。