[发明专利]一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法

权利要求书

1.一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）制备α-茄碱和α-卡茄碱待测液

精确称取马铃薯的芽、绿皮或肉及其制品试样置于具塞定量离心管中，向其中加入适量蒸馏水，涡旋混匀2min，用酸化甲醇定容，再进行涡旋混匀1min；然后再加入无水硫酸钠、无水乙酸镁，手动剧烈摇动1min后再涡旋混匀1min，将所述具塞定量离心管放入到离心机中离心，吸取上清液；

当所述试样为马铃薯芽、绿皮时，取所述上清液置于容量瓶中，然后加入甲醇水溶液定容至刻度，过尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯芽、绿皮试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；

当所述试样为马铃薯肉及其制品时，取所述上清液置于试管中，放到氮吹浓缩仪上浓缩近干，然后加入甲醇水溶液复溶，过尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯肉及其制品试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；

所述马铃薯芽、绿皮试样与所述无水硫酸钠、无水乙酸镁的质量比为1:1:1，所述马铃薯肉及其制品试样与所述无水硫酸钠、无水乙酸镁的质量比为1:2:1；

所述酸化甲醇包括1％甲酸和99％甲醇；

（2）绘制标准曲线

精确吸取α-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液，配制形成一系列具有相同体积、不同浓度的α-茄碱和α-卡茄碱标准液，并将该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以所述系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，获得α-茄碱和α-卡茄碱的标准曲线；

（3）获取样品检测结果

将步骤（1）中制备的所述α-茄碱和α-卡茄碱待测液注入液相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，进而换算得到待测试样中α-茄碱和α-卡茄碱的含量；

所述液相色谱仪的检测条件为：C₁₈液相色谱柱，规格为250mm×4.6mm，粒径5μm；流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈，且流动相A+流动相B＝7+3；流速为0.2mL/min；柱温为30℃；检测波长为195nm；进样量为10μL。

2.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述试样的制备方法为：将马铃薯的芽、绿皮或肉及其制品放入均质器中充分打碎混匀，放入封装容器中，密封并标记，将其置于-20℃下冷冻存放。

3.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述试样与所述蒸馏水的添加比例为1.0g：3.0mL。

4.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述甲醇水溶液体积浓度为40％。

5.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述α-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液的配制方法为：精确称取α-茄碱标准品和α-卡茄碱标准品各0.0100g置于10mL烧杯中，加入适量甲醇搅拌使之溶解后，转移至10mL容量瓶中用甲醇定容。

6. 根据权利要求5所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述α-茄碱标准品为纯度≥99.9％的C₄₅H₇₃NO₁₅，所述α-卡茄碱标准品为纯度≥99.9％的C₄₅H₇₃NO₁₄。

7.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述尼龙微孔滤膜的孔径为0.22μm。

8.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：离心条件为在12000r/min下持续4min。