[发明专利]一种骨肉瘤标志物及其应用、试剂盒

说明书

本发明公开了一种骨肉瘤标记物HOXB8及其应用。HOXB8在骨肉瘤组织中显著高表达，且其表达高低与临床分级有显著相关性，在发生肺转移的骨肉瘤中表达最高；HOXB8表达敲低可抑制骨肉瘤细胞的生长，提示HOXB8可以成为骨肉瘤治疗的靶点。本发明包括HOXB8蛋白在制备如下功能的试剂盒或药物中的应用：(1)作为骨肉瘤新的标记物用于包括分级在内的早期诊断和预后判断；(2)作为药物靶点抑制骨肉瘤的生长。本发明以HOXB8蛋白为生物标志物和靶向疗法为骨肉瘤治疗提供新思路，也为早期诊断和预后判断提供辅助检测指标，有重要临床应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域。涉及一种与骨肉瘤相关的组织肿瘤标记物及其应用。

背景技术

骨肉瘤是最常见的原发性骨恶性肿瘤。骨肉瘤是最常见的青少年原发恶性骨肿瘤，以手术结合新辅助化疗的综合治疗可以治愈约60％患者，仍有40％骨肉瘤患者发生远处转移治疗失败，尤其是肺转移是骨肉瘤致死的主要原因。肺转移灶对现有的化疗药物不敏感，靶向药物未取得突破性的进展，出现肺转移的患者5年生存率低于20％。骨肉瘤肺转移成为制约预后提高的瓶颈，导致近三十年疗效停滞不前。如何有效早期发现并遏制骨肉瘤肺转移是亟待解决的临床问题。既往人们对骨肉瘤发病等进行了一系列探讨，但仍存在已发现的标志物灵敏度不高、特异性不强等缺点。为此，深入研究并阐明骨肉瘤肺转移的分子机制，找到新的骨肉瘤标志物和防治靶标并能有效干预对于控制骨肉瘤的肺转移，进一步提高骨肉瘤的疗效具有极其重要的价值。临床最常用的骨肉瘤分级系统是Ennecking分级，骨肿瘤外科分期由美国病理学家Ennecking在1980年提出，1986年作修改完善。该分期由GTM组成。G为病理分级：G0为良性，G1低度恶性，G2高度恶性。T为肿瘤所在解剖定位：T0为良性肿瘤局限在骨内，T1为间室内，T2间室外。M指转移：M0无转移，M1有转移。良性肿瘤以阿拉伯数字表示，①为静止性，②为活跃性，③为侵袭性。恶性肿瘤以罗马数字表示。根据GTM不同组合形成不同分期，如ⅠA期为G1T1M0，ⅠB期为G1T2M0，ⅡA为G2T1M0，ⅡB为G2T2M0，凡有转移均为Ⅲ期。根据不同分期采用相应的治疗对策。目前这一分期系统已得到国际上广泛的承认和应用，其意义在于合理开展治疗、统一评定标准。

骨肉瘤血行转移最常见部位为肺，所以骨肉瘤患者术后随访胸部影像学检查极其重要。一旦发生肺转移，患者预后较差，生存率远低。但即便如此，对于肺转移患者，目前仍主张手术切除转移灶，转移瘤切除术前、术后同样需要常规化疗，因此发展新的靶向治疗手段成为骨肉瘤防治的迫切需求。通过肿瘤标志物试剂盒，检测患者分子病理变化，做到早期筛查或辅助诊断，这就需要找到有效的肿瘤标记物。通过新的手段如基因治疗、免疫治疗、分子靶向治疗进行特异性治疗则要求找到骨肉瘤细胞的特异性标记。

HOX(Homeobox)基因是一种发育相关基因，其编码的蛋白在胚胎发育过程中起到转录因子调节作用。最早发现其在黑腹果蝇的胚胎发育中发挥着重要作用。HOXB8(NCBI登录号NM_024016.4，GeneID:3218)是HOX基因家族成员之一，位于17号染色体上。近期的研究发HOXB8在多种肿瘤细胞中异常表达，并且与肿瘤的发生发展以及化疗效果相关。本研究发现骨肉瘤病人中HOXB8异常高表达，且随着骨肉瘤级别增加表达更显著,HOXB8高表达与骨肉瘤患者转移与不良预后显著相关；通过构建HOXB8慢病毒载体，建立HOXB8敲降细胞模型，并研究其对骨肉瘤细胞生长及转移的影响。旨在探讨HOXB8的表达与骨肉瘤发生、转移的关系，为进一步研究HOXB8对骨肉瘤的靶向治疗及调控机制奠定基础。并且用shRNA敲降HOXB8表达对于骨肉瘤生长显著抑制。提示HOXB8可作为骨肉瘤生物标记物和治疗靶点，并用于骨肉瘤辅助诊断、疗效检测、预后判断等。经检索，目前没有针对骨肉瘤中HOXB8的相关报道和专利申请。

HOXB8序列信息：

发明内容