[发明专利]一种水凝胶珠的制备方法

权利要求书

1.一种水凝胶珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)大豆分离蛋白(Soybean protein isolate,SPI)的制备：脱皮大豆经筛选后利用粉碎机研磨成粉末，大豆粉与正己烷按照1:3的比例混合，在室温下搅拌20-60min后，在室温，3000-4500g离心15-30min，除去上层液体，收集下层沉淀，如此重复3次，将沉淀在50-70℃下放置5-10h，得到脱脂大豆粉，脱脂大豆粉与水按照1:6(w/v)的比例混合均匀后，调节其pH为7-9，将脱脂大豆粉中的大豆蛋白溶解在水中，在室温下持续搅拌2h，在4℃，6000-9000g下离心30min，移除沉淀得到上层液体，调节上层液体的pH到6-4.5，静置1h，沉淀上层液体中的大豆蛋白，在4℃，6000-9000g下离心30min，得到下层沉淀，之后对下层沉淀水洗1-3次，调节溶液pH为7并完全溶解，冷冻干燥后得到SPI粉末；

(2)SPI与EGCG复合物的制备：SPI溶解在0.01mol/L的磷酸盐缓冲溶液中(pH为7)，在室温下持续搅拌1-3h后，置于4℃冰箱中过夜，使得SPI完全溶解，SPI最终的浓度为20mg/mL，将1-5mg/mL的EGCG加入SPI溶液中，在室温下搅拌30min，使其混合均匀后，调节混合物的pH为7-10后，在持续搅拌90min，得到SPI-EGCG复合物；

(3)海藻酸钠溶液的制备：10-30g海藻酸钠溶解在100mL的0.01mol/L的磷酸盐缓冲溶液(pH为7)中，在25-60℃下搅拌1h后，将温度降到35℃得到海藻酸钠溶液；

(4)水凝胶珠的制备：将海藻酸钠溶液与SPI-EGCG复合物按照1:1-3比例在室温下持续搅拌30min，使其完全混合，将混合溶液置于微胶囊造粒仪中，微胶囊造粒仪的频率为400-900Hz，电压为200-800V，压力为200-600mbar，溶液成串的滴在持续搅拌的10％的CaCl₂溶液中，得到水凝胶珠。

2.根据权利要求1所述的一种水凝胶珠的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的大豆与正己烷在室温下搅拌的时间为30min，最佳离心参数为4500g，30min移除油脂，脱脂大豆粉溶于水中的pH为9，在9000g下离心30min得到溶液在水中的蛋白，沉淀蛋白的最佳pH为4.5，在9000g下离心30min得到下层沉淀，最佳的水洗参数为3次。

3.根据权利要求1所述的一种水凝胶珠的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的SPI溶液在磷酸盐缓冲溶液中最佳搅拌时间为2h，EGCG的最佳浓度为5mg/mL，SPI与EGCG复合的最佳pH为9，在此条件下能够使SPI与EGCG进行共价复合。

4.根据权利要求1所述的一种水凝胶珠的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的海藻酸钠溶解在磷酸盐缓冲溶液中的最佳质量为10g，搅拌的最佳温度为60℃。

5.根据权利要求1所述的一种水凝胶珠的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述的海藻酸钠与SPI-EGCG复合物混合的最佳比例为1:1，微胶囊造粒仪的最佳参数：频率700Hz，电压800V，压力为300mbar。