[发明专利]一种纯化尿蛋白的装置及方法

说明书

本发明公开了一种纯化尿蛋白的装置，包括滤芯管、过滤吸附片和收集管，所述滤芯管的出液口处设有所述收集管，所述过滤吸附片设于所述滤芯管内，所述过滤吸附片包括层叠设置的硝酸纤维素膜和玻璃纤维衬垫。滤芯管与收集管之间设有过滤吸附片，过滤吸附片能够过滤沉淀蛋白以及吸附可溶性小分子肽，极大地简化临床生物样本的前处理，便于纯化样本中的蛋白质，减少操作难度。

技术领域

本发明涉及医疗检测技术领域，尤其涉及一种纯化尿蛋白的装置和方法。

背景技术

尿液是血液的一种滤过产物，因其具有许多独特的优势，比如，非侵入性易收集、可以大量获得、性质相对稳定、易于保存等，从而成为理想的临床疾病检测和研究的样本。一些研究已经表明，在正常人体的生理条件下，尿液中的蛋白质约30％是血浆蛋白质，而其它70％是由肾脏和泌尿生殖道衍生蛋白组成。因此，尿液能够直接反应肾脏和泌尿系统的功能状态，在一定程度上可以反映整个机体的功能状态，因此，尿液是寻找疾病生物标志物的一个重要来源。生物标志物是反应机体正常或不正常生物状态的分子，包括蛋白质、核酸、小分子化合物、离子等等，可用于临床疾病的诊断和治疗评估。

目前，临床上尿液中的生物标志物检测方法十分有限，并且方法的灵敏度和特异性都不能满足临床疾病诊断的需求，比如：尿蛋白的检测通常采用化学的方法不能分类，电泳的方法可以分类，但是操作繁琐，干扰因素较多，灵敏度不够；小分子化合物(如多巴胺类、维生素类、氨基酸等)检测多采用毛细管电泳法、免疫学方法等，实验的干扰因素较多，并且数据波动较大。近年随着蛋白质组学技术的发展，尤其是基于质谱、色谱的蛋白组学技术和代谢组学技术的发展，使得越来越多的潜在生物标志物被发现。这些生物标志物有助于辅助诊断，病因分析，评估治疗效果，进而优化治疗。但是基于质谱、色谱的检测技术，对于临床生物样本的检测，样本前处理非常关键，如样本中蛋白质的纯化(或去除)、干扰物质的去除、离子的去除等等，尤其样本中蛋白质的纯化，相关操作都比较繁琐，难度也比较大。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种便于操作的纯化尿蛋白的装置及方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种纯化尿蛋白的装置，包括滤芯管、过滤吸附片和收集管，所述滤芯管的出液口处设有所述收集管，所述过滤吸附片设于所述滤芯管内，所述过滤吸附片包括层叠设置的硝酸纤维素膜和玻璃纤维衬垫。

为了解决上述技术问题，本发明还采用的技术方案为：一种纯化尿蛋白的方法，利用上述的纯化尿蛋白的装置进行纯化，包括以下步骤：

S1、制备尿蛋白沉淀试剂和尿沉淀蛋白复溶液，其中尿蛋白沉淀试剂冷存备用；

S2、将样本与尿蛋白沉淀试剂充分混合形成混合液后静置；

S3、将步骤S2中静置后的混合液添加至滤芯管中并将混合液进行离心处理；

S4、步骤S3中的混合液离心后，取收集管内溶液，形成第一样品；

S5、步骤S4中的第一样品可以进行代谢组学小分子物质检测。

本发明的有益效果在于：滤芯管与收集管之间设有过滤吸附片，过滤吸附片能够过滤沉淀蛋白以及吸附可溶性小分子肽，极大地简化临床生物样本的前处理，便于纯化样本中的蛋白质，减少操作难度。

附图说明

图1为本发明实施例一的纯化尿蛋白的装置的结构示意图；

图2为本发明实施例一的纯化尿蛋白的方法的流程图；

图3为本发明实施例一的蛋白质分子量标准品示例图；

图4为样本尿蛋白SDS-PAGE凝胶电泳处理前后比对效果图；

图5为另一样本尿蛋白SDS-PAGE凝胶电泳处理前后比对效果图。