[发明专利]一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法

说明书

本发明公开了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法：将剂量为按体重一日2～3mg/Kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：连续施用7天，末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。或：将剂量为按体重4～6mg/Kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：第1天、第8天施用；末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。本发明使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型，并对比各种方法间的优劣性，筛选出顺铂最佳的浓度及给药时间，为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型提供了一种操作简单，成功率高，结果可靠的实验方法。

技术领域

本发明涉及一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。

背景技术

卵巢早衰(POF)是指女性40岁前以闭经、不育、雌激素缺乏及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病。一般人群中发病率为1％～3％，在继发性闭经妇女中占4％～8％，在20岁以前的发病率为0.01％。近年来POF在育龄妇女中的发生率有逐年升高且向年轻化发展的趋势，由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌激素量减少，即可导致一些其他疾病，如骨质疏松、泌尿生殖道萎缩、脂质代谢紊乱、心血管疾病。

顺铂又称顺氯氨铂、氯氨铂、DDP、锡铂，是目前常用的金属铂类络合物，在分子中铂原子对其抗肿瘤作用有重要意义。但只有顺式才有意义，反式无效。其可与DNA链交叉连接，显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运，即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/L)，氯离子为水所取代，电荷呈阳性，具有类似烷化剂双功能基团的作用，可与细胞核内DNA的碱基结合，形成三种形式的交联，造成DNA损伤，破坏DNA复制和转录，高浓度时也抑制RNA及蛋白质的合成。顺铂具有抗癌谱广、乏氧细胞有效、作用性强等优点，已普遍用于治疗睾丸癌、卵巢癌、子宫癌、膀胱癌、颈部癌、前列腺癌、脑癌等，疗效显著。但顺铂用于治疗癌有一定的毒性，会引起副作用，与卵巢的损害有直接关系，有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡，引起组织坏死，从而导致卵巢功能早衰。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡，引起组织坏死，从而导致卵巢功能早衰”这一原理，使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型，并对比各种方法间的优劣性，筛选出顺铂最佳的浓度及给药时间，为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型最佳剂量提供了一种操作简单，成功率高，结果可靠的实验方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法：将剂量为按体重一日2～3mg/Kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：连续施用7天，末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。或：将剂量为按体重4～6mg/Kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：第1天、第8天施用；末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。

进一步地，可将顺铂溶于0.9％氯化钠溶液配置成顺铂注射液，然后注射。所述顺铂，可市场常规购买得到，比如齐鲁制药公司生产的顺铂。

进一步地，注射期间每天称量大鼠体重，注射后每周称量2次；末次注射后15天，麻醉取血检测激素水平，取卵巢检测对比卵巢重量，实验期间每天进行阴道涂片，观测动情周期变化。

进一步地，检测激素水平是指：检测雌激素(E2)、促卵泡生长素(FSH)和促黄体生成素(LH)的水平。

进一步地，检测对比卵巢重量是指：比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地，阴道涂片是指：采用阴道脱落细胞涂片法，使用染色剂为亚甲基蓝。

本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。

本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

附图说明