[发明专利]复合体、组织修复材料及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种复合体、组织修复材料及其制备方法和应用，所述复合体的药效稳定、靶向性高、传递效率高，在体内有良好的耐受性，并可以通过内源物发挥多种生物学功能，同时避免了体内的免疫反应。所述组织修复材料在皮肤疾病治疗方面具有稳定的治疗效果和靶向性，特别在久治不愈的糖尿病并发症治疗方面具有显著的效果。

技术领域

本发明属于生物制品技术领域，尤其涉及一种复合体、组织修复材料及其制备方法和应用。

背景技术

组织、器官的损伤或功能障碍是人类健康所面临的主要危害之一，也是人类疾病和死亡的最主要原因。目前临床常见的组织器官缺损修复技术主要有三种：异体组织移植，但存在组织相容性及供体来源严重不足的问题；自体组织移植，这种移植以牺牲正常组织为代价，且组织异位常导致功能紊乱；应用人工合成材料代用品，易导致异物反应、继发感染及周围组织萎缩等。

间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层，具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入和免疫调控等特点，可以调控组织再生和伤口愈合。细胞外囊泡是间充质干细胞介导细胞间通讯以增强组织修复的关键分泌产物之一，外泌体就属于细胞外囊泡的一种，它是一种直径在40～100nm的圆形单层膜结构，由机体多种细胞内膜以出芽方式形成，并广泛分布于不同体液当中，携带多种蛋白质、mRNA和microRNA等，可通过生物合成与内吞作用参与到精确而复杂调控的细胞通讯、细胞迁移、细胞增殖与分化、调节免疫等过程。但未做任何改变的外泌体会在肝、肾、脾等器官集聚，并迅速被胆管系统、泌尿系统排泄，或被网状内皮系统吞噬，不能有效地到达目标组织器官。

外泌体的靶向修饰主要是通过先转染后分离的方式，即先通过转染的方式使细胞表达靶向蛋白，然后从细胞中分离出表达靶向蛋白的外泌体，其修饰效率低，操作较繁琐，所以寻找修饰效率高、操作简便的外泌体靶向修饰方法迫在眉睫。适配子是人工合成的单链寡核苷酸，可通过指数富集配基的系统进化技术(SELEX)进行体外筛选、扩增和富集，常形成发卡、茎环等二级结构及三维立体空间结构，可通过分子构象匹配与靶标结合，具有亲和力高、特异性强、免疫原性低的特点。已有研究将核酸适配体通过化学键连接到人工合成的脂质体上，以制备适配体靶向脂质体载药系统，以增强药物的稳定性、靶向性和传递效率。然而人工合成的脂质体虽然便于修饰功能基团，但成本大幅增加，且合成过程也更加繁琐，而且脂质体来源于外来物质，人体耐受性有限，容易在体内产生免疫反应。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种复合体，所述复合体的药效稳定、靶向性高、传递效率高，在体内有良好的耐受性，并可以通过内源物发挥多种生物学功能，同时避免了体内的免疫反应。

本发明的进一步目的是提供一种组织修复材料，所述组织修复材料在皮肤疾病治疗方面具有稳定的治疗效果和靶向性，特别在久治不愈的糖尿病并发症治疗方面具有显著的效果。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明第一方面提供一种复合体，所述复合体由靶向基团和药用囊泡结合而成，所述靶向基团选自适配子，所述药用囊泡选自外泌体。

本发明利用适配子对特定细胞的靶向作用，使外泌体迁移并作用于目标细胞，提高了外泌体的生物利用率，达到促进组织修复的目的。经过适配子修饰的外泌体可以加快来自慢性不愈合伤口的成纤维细胞的生长和迁移，并能有效激活生长因子信号通路，提高血管生成相关基因和基质蛋白的表达，诱导新生血管的生成，因此，本发明提供的复合体可作为安全有效的产品促进慢性难愈合伤口或骨缺损伤口的愈合。

优选地，每个复合体包含所述适配子和外泌体的数量比为：n:1，n≧1，n为整数。

优选地，所述适配子选自血管内皮细胞靶向适配子。所述血管内皮细胞靶向适配子对血管内皮细胞具有靶向作用，可使外泌体迁移并作用于血管内皮细胞，提高了外泌体的生物利用率，达到促进血管内皮细胞增殖，组织血管修复的目的。