[发明专利]一种广适性植物组织培养基及1/2培养基

说明书

本发明公开了一种广适性植物组织培养基及1/2培养基，每1000mL培养基中含有：KNO₃2662mg、(NH₄)₂SO₄264mg、NH₄H₂PO₄288mg、MgSO₄·7H₂O 370mg、CaCl₂332mg、MnSO₄·H₂O 15mg、ZnSO₄·7H₂O 4mg、H₃BO₃3mg、CoCl₂·6H₂O 0.02mg、CuSO₄·5H₂O 0.04mg、Na₂MoO₄·2H₂O 0.1mg、NaFeEDTA 37mg、肌醇100mg、烟酸2mg、盐酸硫胺素7mg、盐酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg；将大量元素含量减半，即得到1/2CS组织培养基。本发明植物组织培养基，其能广泛应用于多种植物组织培养，培养效果与MS培养基相当或优于MS培养基，且其在不引入新的易制爆成分的前提下，去除了现有培养基中含有的易制爆试剂NH₄NO₃，便于培养基的购买、储存及管理；而且用其配置的液体培养基的pH稳定性好。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，特别涉及一种植物组织培养基。

背景技术

MS培养基于1962年由Murashige和Skoog设计，是目前植物组织培养中应用最为广泛的培养基。据《危险化学品安全管理条例》(国务院令第591号)、《民用爆炸物品安全管理条例》及《易制爆危险化学品名录》(2017年版)可知，MS培养基的主要成分硝酸钾、硝酸铵均为易制爆管制试剂，随着国家监管越发严格，所有易制爆试剂的购买、储存及使用变得越来越困难，尤其是兼有硝态氮和铵态氮的硝酸铵，其纯品被禁止市场流通，为植物组织培养带来很大难度。B5培养基于1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计，N6培养基于1974年由朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计，两者均由MS培养基衍生而来，在有些植物组织培养研究中广泛应用，虽然B5和N6培养基除了硝酸钾外不含其他易制爆成分，但两者中的钙离子和镁离子含量均大幅降低，且B5培养基中铵离子大幅减少、N6培养基中钾离子大幅增加，这些离子浓度的大幅波动对一些植物的组织培养是不利的。CN102224802A草莓增殖培养基公开了一种无硝酸铵培养基，但其硝酸钾及硫酸铵含量过高，仅适用于草莓组织培养；CN105104208A一种草莓组织培养基及其配制方法公开了一种无硝酸铵培养基，在草莓组织培养中取得很好的效果，但其引入的尿素和硫酸铵成分含量过高，这对多种植物生长不利；CN108812313A一种植物组织培养的基本培养基及CN108812329A一种无NH4NO3植物组织培养用培养基分别公开了一种无硝酸培养基，获得较好的培养效果，但新引入的硝酸钙和硝酸镁两种成分均为易制爆试剂；CN109717076A一种植物组培专用培养基公开了一种无硝酸铵培养基，可提高植物组培成功率，但引入了易制爆试剂硝酸钠，且其仅适用于植物离体培养，不具有通用性。此外，现有的植物组织培养基，包括MS、B5、N6以及其他公开的植物组织培养基，它们被用于配制液体培养基时的pH值波动大，在用于植物水培时均需要调节pH，过程繁琐，耗费时间。因此，急需一种既无硝酸铵、也不引入新的易制爆成分，并且培养效果与MS培养基相当或优于MS培养基的广泛适用于多种植物组织培养的pH稳定型培养基。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种在不额外引入易制爆成分的前提下，去除了市场禁止流通的易制爆成分NH₄NO₃，且pH稳定的广泛适用于多种植物组织培养的植物基本培养基，以解决现有植物组织培养基存在的技术问题。