[发明专利]一种靶向沉默人MYU基因的siRNA及其应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种靶向沉默人MYU基因的siRNA及其应用。本发明所述的siRNA分别命名为siMYU‑1、siMYU‑2。通过qRT‑PCR技术检测结果证实本发明的siMYU‑1以及siMYU‑2均对my基因的表达具有沉默作用，且转染PC9细胞后可以抑制PC9细胞的增殖能力和迁移能力响。鉴于MYU作为一种潜在的肺癌治疗靶点，因此本发明所提供的两种siRNA序列及其相关生物试剂可用于研究和制备治疗肺癌的相关疾病的药物。进一步可以作为靶点药物针对性地对MYU表达进行干扰，为抗肺腺癌新型药物研发提供了新思路和科学依据，在今后的肺腺癌治疗研究中具有潜在应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种靶向沉默人MYU基因的siRNA及其应用。

背景技术

肺癌是全球癌症相关死亡的最常见原因_ENREF_1。非小细胞肺癌(NSCLC)包括肺腺癌和鳞状细胞癌，约占所有肺癌病例的85%，据统计非小细胞肺癌患者的5年生存率低于15%。在非小细胞肺癌中，最常见的是肺腺癌，深入了解肺腺癌的分子机制并寻找到相关的治疗靶点与治疗药物成为肺癌的诊断、预后及治疗的关键。

RNA干扰技术(RNA interference，RNAi)是物种在进化上的一种高度保守的基因防御机制，即一种依赖于双链RNA特异性短序列实现转录后的基因沉默的技术。目前实验室常用的RNAi技术为siRNA寡核苷酸载体。siRNA是短的双链RNA，大小在19-29 nt左右，3´端有两个游离的碱基，可激活RNA的干扰，通过与目标mRNA互补序列结合，特异性地实现mRNA降解。

长链非编码RNA(lncRNAs)是一类长度超过200个核苷酸的转录本，没有或只有有限的蛋白质编码能力。越来越多的研究表明lncRNA参与许多细胞过程，如增殖、迁移、侵袭以及凋亡。此外，与正常组织相比，多种肿瘤组织中的许多lncRNAs表达失调，表明lncRNAs可能在多种癌症类型中起作用。lncRNA MYU(NCBI：NR_036480.1)又称为智人VPS9D1反义RNA1 (VPS9D1-AS1)，其在人类多种癌症组织中显著高表达，为非小细胞肺癌和胃癌中潜在的预后生物标记物，在NSCLC中，MYU上调并且MYU的高表达预示着NSCLC患者的不良预后。可见，MYU在肿瘤的发生发展与转移中具有重要作用，然而，MYU对于肺癌中的作用和机制的研究尚处于初步阶段，因此，通过靶向性沉默MYU的siRNA序列研究有可能为肺癌的早期诊断，疾病治疗和新的靶向药物研究提供新的方向。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种靶向沉默MYU的及其应用，通过转染该siRNA的靶向基因发现对人肺腺癌细胞PC9的增殖活性及迁移能力具有正相关性影响，可用于治疗肺癌药物的制备，尤其是治疗肺腺癌药物的制备。

为实现上述发明目的，本发明采取的技术方案为：

本发明提供了一种靶向性沉默MYU的siRNA，所述的siRNA序列为siMYU-1 或siMYU-2中的一种，其中，siMYU-1的上游序列如SEQ ID NO.1所示，即：5’-CCCUGCAAGCCAUGGGUAATT-3’，下游序列如SEQ ID NO.2所示，即：5’-UUACCCAUGGCUUGCAGGGTT-3’；siMYU-2的上游序列如SEQ ID NO.3所示，即：5’-CAAGAAGGCUGGUCACAGUTT-3’，下游序列如SEQ ID NO.4所示，即：5’-ACUGUGACCAGCCUUCUUGTT-3’。

在一些实施方案中，本发明将上述siRNA序列分别转染至人肺腺癌细胞PC9中，并以si-NC为参照物，观察转染后siMYU-1 或siMYU-2以及参照物si-NC对肺腺癌细胞PC9增殖能力、迁移作用的影响。试验结果可知本发明所提供的siRNA序列siMYU-1 或siMYU-2均具有抑制肺癌细胞的增殖及迁移能力，可有效地沉默MYU，从而达到治疗肺腺癌的目的。