[发明专利]一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于：包括：能够识别α-乳白蛋白单克隆抗体和β-乳球蛋白单克隆抗体的Protein G、能够特异性识别牛奶α-乳白蛋白的α-乳白蛋白单克隆抗体、能够特异性识别牛奶β-乳球蛋白的β-乳球蛋白单克隆抗体、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、化学发光底物液；Protein G的浓度为15～20μg/mL；α-乳白蛋白单克隆抗体的浓度为1～1.5μg/mL；β-乳球蛋白单克隆抗体的浓度为1～1.5μg/mL；α-乳白蛋白、β-乳球蛋白浓度均为100μg/mL；化学发光底物液包括辣根过氧化酶HRP、p-溴苯酚和鲁米诺；所述辣根过氧化酶HRP浓度为20～25μmol/L，所述p-溴苯酚浓度为40～50mmol/L，所述鲁米诺的浓度为10～15mmol/L，pH为10～11。

2.根据权利要求1中所述的一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于：所述Protein G与上述两个单克隆抗体的Fc片段特异性结合，使得Protein G-单克隆抗体可以特异性识别牛奶致敏原α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。

3.使用权利要求1中所述的一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测试剂盒的检测方法，包括如下步骤：其特征在于：

a、依次将Protein G和α-乳白蛋白单克隆抗体、β-乳球蛋白单克隆抗体结合在酶标板上，形成Protein G-单克隆抗体复合物；

b、配制系列浓度牛奶致敏原蛋白，加入酶标板，孵育，使Protein G-单克隆抗体特异性识别牛奶致敏原蛋白；

c、依次加入H2O2溶液和化学发光底物液，孵育，测定信号值。

4.根据权利要求3中所述的一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测方法，其特征在于：所述步骤a中Protein G的浓度为18～20μg/mL。

5.根据权利要求3中所述的一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测方法，其特征在于：所述步骤a中α-乳白蛋白单克隆抗体、β-乳球蛋白单克隆抗体的浓度为1.2～1.5μg/mL。

6.根据权利要求3中所述的一种牛奶致敏原的化学发光免疫检测方法，其特征在于：所述步骤c中反应时间为20～30min。