[发明专利]CA242的结合蛋白及其应用、检测方法和试剂盒

说明书

本发明公开了一种CA242的结合蛋白及其应用、检测方法和试剂盒，涉及抗体技术领域，本发明公开的结合蛋白包括抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包括如下互补决定区中的至少一个：CDR‑VH1、CDR‑VH2、CDR‑VH3、CDR‑VL1、CDR‑VL2和CDR‑VL3。本发明提供的结合蛋白可以特异性结合CA242，具有较好的结合活性和亲和力，特异性强，灵敏度高，可用于在科研、检测以及肿瘤诊断等领域对CA242蛋白的特异性检测。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种CA242的结合蛋白及其应用、检测方法和试剂盒。

背景技术

肿瘤标志物(Tumor Marker)是反映肿瘤存在的化学类物质。它们不存在于正常成人组织而仅见于胚胎组织，或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量，它们的存在量变可以提示肿瘤的性质，借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能，以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。CA242是一种唾液酸化后的粘蛋白型糖类抗原，人体正常组织中含量很少甚至没有，发生恶性肿瘤时，肿瘤组织和血清中其含量可升高，胰腺癌和结直肠癌时尤为明显，因此，其可作为一种新的肿瘤标志物。

20世纪80年代，专家利用杂交瘤技术获得了能识别肿瘤特异性大分子的糖蛋白抗原(carbohydrate antigen,CA)，并研制了单克隆抗体识别系统。CA是肿瘤细胞的相关抗原。常用的CA系列有：CA125(卵巢癌相关抗原)；CA 19-9(胰腺、肠癌相关抗原)；CA15-3(乳腺癌相关抗原)。1983年Limdholm等人用人结直肠癌细胞COLD205免疫小鼠得到系列抗体以后相继发现了与这些抗体相应的系列抗原，包括CA19-9，CA50，CA242等。这一系列抗原出现于同种粘蛋白的表面，且抗原决定簇均为糖链结构，但有不同的肿瘤特异性，因此作为不同的肿瘤标志物。

CA19-9及CA50所形成的监测系统已经被广泛用于消化道恶性肿瘤尤其是结直肠癌的诊断。CA242是一种唾液酸化的鞘糖脂类抗原，几乎总是和CA50一起表达，但两者受不同的单克隆抗体识别。在临床上均被用于消化道恶性肿瘤尤其是胰腺癌、结直肠癌的诊断。CA50、CA19-9易受肝功能以及胆汁郁积的影响，在良性阻塞性黄疸以及肝实质性损害疾病时常出现假阳性。与CA19-9、CA50相比，新一代的CA242在胰腺癌、胆囊癌和消化道癌中的灵敏度、特异性更高。CA242主要存在于胰腺和结肠的恶性肿瘤细胞中。在胰腺癌和结肠癌的恶性组织中具有明显的表达，而在良性肿瘤中出现的CA242比CA19-9和CA50低得多。作为一种新的肿瘤标志物CA242的优点就在于其特异性较高，即在恶性肿瘤时升高明显，良性疾病时一般不升高。因此，CA242临床诊断恶性肿瘤比CA19-9和CA50的特异性更好，在胰腺癌和结直肠癌的诊断中CA242是一种比CA50和CA19-9更有价值的指标。

国外研究表明，在胰腺癌及晚期结直肠癌患者的血清中，CA242普遍具有显著的升高。对结直肠癌而言，CA242相对于CA19-9及CA50更高的灵敏性。影响血清中CA242含量的因素很多，除抗原本身的因素外，肿瘤的恶性程度、扩散速度及范围以及抗原的代谢和排泄等，均影响其血清水平。用高亲和力的CA242单克隆抗体检测血清CA242，其原理基于C242可与粘蛋白表面的抗原CA242特异性结合，经标记后利用免疫血清学方法检测。

在结直肠癌的诊断中，目前CEA(癌胚抗原)是目前应用最多的肿瘤标志物，但其在大肠癌的早期(Dukes A、B期)灵敏度甚低。但是，联用CEA和CA242，诊断大肠癌的灵敏度比单用任何一种要高。在诊断结直肠癌时，CA242的升高早于CEA的升高及临床复发症状的出现，因此，联用CA242与CEA具有更好的诊断价值。在术后检测中，CA242更优于CEA，成为CEA很好的补充诊断指标。

CA242是胰腺癌病人中首先出现的肿瘤相关抗原。在诊断胰腺癌时，多数报道认为它具有与CA50和CA19-9相当或较低的灵敏度，但是具有更高的特异性，即在良性肝胆疾病和胰腺炎时，血清CA242仅具轻微升高，因此其假阳性率明显低于CA19-9和CA50。