[发明专利]抗cTnI的蛋白和检测cTnI的方法

说明书

本发明公开了一种抗cTnI的蛋白和检测cTnI的方法，涉及抗体技术领域，本发明公开的结合蛋白包括抗原结合结构域；抗原结合结构域包括至少一个互补决定区。本发明提供的结合蛋白可以特异性结合cTnI，具有较好的结合活性和亲和力，有利于提高检测的特异性和灵敏度，可用于cTnI的检测和cTnI水平异常疾病的诊断，为cTnI的检测和cTnI水平异常疾病的诊断提供更多样的蛋白选择。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种抗cTnI的蛋白和检测cTnI的方法。

背景技术

20世纪80年代前，世界卫生组织(WHO)一直将心肌酶谱活性作为急性心肌梗死(AMI)的诊断标准之一。20世纪80年代末，科研人员发现，肌钙蛋白(roponin，Tn)的敏感性和特异性高于磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶和天冬氨酸氨基转移酶等生物标志物。心肌肌钙蛋白(cTnI)仅存于心肌，是心肌细胞的标志物，其异常改变可影响心脏的舒缩功能，并可用于诊断心肌坏死，判断心肌损伤等，成为心肌细胞损伤敏感性和特异性最强的标志物之一，是公认的快速诊断AMI和急性冠脉综合征(acutecoronary syndromes，ACS)以及协助ACS危险分层和反映其预后的主要生化标志。

正常人血液中cTnI含量一般低于0.3μg/L。当心肌细胞胞膜完整性因缺血或缺氧等受到破坏时，游离的cTnI可迅速透过细胞膜进入血流。因此，在发病初期快速、灵敏且准确的测定人血中的cTnI及其变化趋势对急性心肌梗死的诊断、急性冠状动脉综合征的危险分层、监测各种因素导致的心肌损伤等有着重要的临床意义。临床上用于检测cTnI水平的方法有酶联免疫吸附法(ELISA)，化学发光，胶体金等，不同方法都有各自的优缺点。

这些检测方法都是建立在特异单抗的基础上的，都需要针对于cTnI的特异性单克隆抗体。目前用于检测cTnI的单克隆抗体灵敏度、特异性以及亲和力上都存在一些缺陷，还有较大的改善空间，因此，本领域针对检测cTnI的单克隆抗体的仍然存在着强烈需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗cTnI的蛋白和检测cTnI的方法。本发明提供的结合蛋白可以特异性结合cTnI，具有较好的结合活性和亲和力，有利于提高检测的特异性和灵敏度，可用于cTnI的检测和cTnI水平异常疾病的诊断，为cTnI的检测和cTnI水平异常疾病的诊断提供更多样的蛋白选择。

名词定义

术语“结合蛋白”泛指包含CDR区的一切蛋白/蛋白片段，特别是抗体或抗体功能片段。“抗体”此用语包括多克隆抗体及单克隆抗体，“抗体功能片段”包括上述这些抗体的抗原化合物结合片段，包括Fab、F(ab’)2、Fd、Fv、scFv、双特异抗体和抗体最小识别单位，以及这些抗体和片段的单链衍生物。抗体的类型可以选择IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE、IgD。此外，“抗体”此用语包括天然发生的抗体以及非天然发生的抗体，包括例如嵌合型(chimeric)、双功能型(bifunctional)和人源化(humanized)抗体，以及相关的合成异构形式(isoforms)。“抗体”此用语可和“免疫球蛋白”互换使用。

抗体的“可变区”或“可变结构域”是指抗体的重链或轻链的氨基端结构域。重链的可变结构域可以被称为“VH”。轻链的可变结构域可以被称为“VL”。这些结构域通常是抗体的最可变的部分，并含有抗原结合位点。轻链或重链可变区(VL或VH)由被三个称为“互补决定区”或“CDR”的高变区打断的构架区构成。构架区和CDR的范围已被精确定义，例如在Kabat(参见《免疫重要的蛋白质的序列》(Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest)，E.Kabat等，美国卫生与人类服务部(U.S.Department of Health and HumanServices)，(1983))和Chothia中。抗体的构架区，即构成要件轻链和重链的组合的构架区，起到定位和对齐CDR的作用，所述CDR主要负责与抗原的结合。