[发明专利]一种丙型肝炎病毒核酸检测样本的处理方法

说明书

本发明公开了一种丙型肝炎病毒核酸检测样本的处理方法，属于体外检测技术领域，方法包括以下步骤：S1、将血清/血浆样本分A黄疸、B溶血、C脂血、D正常，四类；S2、A黄疸、B溶血、C脂血三类样本分别12000～15000rpm高速离心5～10min，正常样本不做处理；S3、A黄疸和B溶血的样本分别吸取上清液，得到处理后血清/血浆样本；C脂血样本吸弃上层悬浮物，吸取中间位置血清，得到处理后血清/血浆样本。本发明通过将分类后的样本进行高速离心，与未做处理的样品相比，避免样品因存在黄疸、溶血、脂血而造成实验抑制，保证实验成功率，避免假阴性结果的产生，提高了检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及体外检测技术领域，尤其涉及一种丙型肝炎病毒核酸检测样本的处理方法。

背景技术

丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病，据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为3％，估计约1.8亿人感染了HCV,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。丙型肝炎病毒(Hepatitis C Vrius)慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者科发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC),对患者的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。因此，开展丙型肝炎病毒核酸检测能很好的辅助丙肝治疗。

目前检测丙型肝炎病毒主要采用试剂盒，如湖南圣湘生物科技有限公司生产的丙型肝炎病毒核酸检测试剂盒，其检测前需要对样本进行前处理，主要流程为：摆管→标记号码→加试剂及样本→混匀静置30min→第1次瞬时离心5s放磁架→弃上清→加HCV RNA洗液→第2次瞬时离心5s放磁架→弃上清→弃残液→加模板上机。其结果分析是通过ABI7500实时荧光定量PCR仪结果计算分析软件直接得到样本定量结果，若该样本的VIC荧光通道扩增曲线成明显S型，即该样本实验成功，报告FAM荧光通道相应的测定结果；如果有VIC荧光通道扩增曲线无数值或Ct38，则该样本的检测结果无效。

然而，血液样本通常并非十分理想的健康情况，当血清样本状态为黄疸、溶血、脂血等情况时，这种特殊样本在检测时会受到红细胞、胆红素、脂肪颗粒等的影响，抑制HCVRNA提取，导致结果假阴性，轻则实验失败，患者需重新采样，造成人员和试剂成本的浪费，增加患者采样的痛苦，重则造成结果的误判，延误患者最佳治疗时机。

发明内容

有鉴于此，本发明针对上述技术问题，提供一种丙型肝炎病毒核酸检测样本的处理方法，减少红细胞、胆红素、脂肪颗粒对丙型肝炎病毒核酸检测结果的影响，提高实验的成功率和准确率。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种丙型肝炎病毒核酸检测样本的处理方法，包括以下步骤：

S1、将血清/血浆样本分A黄疸、B溶血、C脂血、D正常，四类；

S2、A黄疸、B溶血、C脂血三类样本分别12000～15000rpm高速离心5～10min，正常样本不做处理；

S3、A黄疸和B溶血的样本分别吸取上清液，得到处理后血清/血浆样本；C脂血样本吸弃上层悬浮物，吸取中间位置血清，得到处理后血清/血浆样本。

优选地，处理后血清/血浆样本，在加PCR模板上机检测前，将样本振动或离心2S～3S。

优选地，上述的丙型肝炎病毒核酸检测样本的处理方法，包括以下步骤：

S1、将血清/血浆样本分A黄疸、B溶血、C脂血、D正常，四类；

S2、A黄疸、B溶血、C脂血三类样本分别12000～15000rpm高速离心5～10min，正常样本不做处理；

S3、A黄疸和B溶血的样本分别吸弃底部沉淀，C脂血样本吸弃上层悬浮物，得到处理后血清/血浆样本；

S4、将样本与提取试剂混匀，静置；

S5、瞬时离心后置于磁分离器上，弃上清；