[发明专利]一种纳米杂化丝素蛋白水凝胶及其制备方法和应用有效
申请号: | 201911234756.1 | 申请日: | 2019-12-05 |
公开(公告)号: | CN110917400B | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 张黎明;邓立志;杨凡巧;王彦 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | A61L27/38 | 分类号: | A61L27/38;A61L27/12;A61L27/22;A61L27/52;A61L27/50 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 裘晖;苏运贞 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纳米 丝素 蛋白 凝胶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种纳米杂化丝素蛋白水凝胶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将蚕茧和Na2CO3水溶液进行煮沸脱胶、洗涤烘干后即得丝素蛋白纤维;将丝素蛋白纤维和LiBr溶液混合,溶解,得到溶液A;将溶液A透析、过滤,得到再生丝素蛋白水溶液;
(2)将纳米级羟基磷灰石溶液和步骤(1)中的再生丝素蛋白水溶液混匀后,超声,得到凝胶化时间可控的nHA杂化丝素蛋白水溶液;
(3)将步骤(2)制备得到的杂化丝素蛋白水溶液与干细胞混匀,原位凝胶化后进行细胞培养,即得纳米杂化丝素蛋白水凝胶;
步骤(1)中所述的透析的条件为于4~10℃条件下进行透析;
步骤(2)中所述的超声的条件为50~200 W超声5~120 s。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)还包括稀释或浓缩步骤,在过滤步骤后进行。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,
步骤(1)中所述的再生丝素蛋白水溶液中再生丝素蛋白的浓度为质量百分比3%~15%;
步骤(2)中所述的纳米级羟基磷灰石的用量按相当于所述的再生丝素蛋白质量的2%~30%计算;
步骤(3)中所述的干细胞的密度为3×103~6×105 个/mL。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,
步骤(1)中所述的溶液A中的丝素蛋白的质量分数为15%~20%;
步骤(2)中所述的纳米级羟基磷灰石溶液中纳米级羟基磷灰石的浓度为15~30 mg/mL。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,
步骤(1)中所述的Na2CO3水溶液的浓度为0.02 M;
步骤(1)中所述的Na2CO3水溶液的用量按Na2CO3水溶液:蚕茧=质量比45~55: 1配比计算;
步骤(2)中所述的纳米级羟基磷灰石的粒径小于200 nm。
6.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,
步骤(1)中所述的煮沸时间为15~45 min;
步骤(1)中所述的溶解的条件为45~70℃溶解1~4 h;
步骤(1)中所述的LiBr溶液的浓度为9~9.5 M;
步骤(1)中所述的再生丝素蛋白水溶液在4~10℃条件下保存。
7.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述的凝胶化时间为10~600 s。
8.一种纳米杂化丝素蛋白水凝胶,其特征在于,由权利要求1~7任一项所述的制备方法制备得到。
9.权利要求8所述的纳米杂化丝素蛋白水凝胶在制备生物医学工程材料中的应用。
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