[发明专利]一种重组载体、宿主细胞及稻曲病菌效应蛋白的应用

说明书

本发明公开了一种重组载体、宿主细胞及稻曲病菌效应蛋白的应用，属于生物技术领域。该重组载体用于表达稻曲病菌效应蛋白，其是通过将稻曲病菌效应蛋白的编码基因插入到pET‑32a载体的EcoR I与Xho I酶切位点之间得到的；所述稻曲病菌效应蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示；所述稻曲病菌效应蛋白的编码基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本发明通过将体外表达得到的稻曲病菌效应蛋白喷施在拟南芥叶片后，可以显著提高拟南芥中的活性氧和胼胝质含量，以及可以提高拟南芥对病原细菌Pseudomonas syringae pv.tomato(Pst)DC3000的抗病性，其为提高植物抗性和诱导植物防御反应提供了新的途径，在农业生产上具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体是一种重组载体、宿主细胞及稻曲病菌效应蛋白的应用。

背景技术

针对植物的抗病性，目前一般是通过喷施农药等化学方法进行防治的，该方法会存在污染环境和危害人体健康的问题。

因此，目前急需一种环保且可以提高植物抗病性的天然物质，以解决上述问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种重组载体，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

一种重组载体，所述的重组载体用于表达稻曲病菌效应蛋白；所述的重组载体是通过将稻曲病菌效应蛋白的编码基因插入到pET-32a载体的EcoR I与XhoI酶切位点之间得到的；所述稻曲病菌效应蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示；所述稻曲病菌效应蛋白的编码基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。

本发明实施例的另一目的在于提供一种包含上述重组载体的宿主细胞。

作为本发明实施例的一个优选方案，所述的宿主细胞为大肠杆菌BL21。该含有上述重组载体的宿主细胞的保藏编号为KKA4I72019，其于2019年4月7日保藏到沈阳农业大学植物保护学院水稻病害研究室，保藏地址：辽宁省沈阳市沈河区东陵路120号。

本发明实施例的另一目的在于提供一种稻曲病菌效应蛋白在提高植物的抗性中的应用，所述的稻曲病菌效应蛋白是通过上述宿主细胞表达得到的。

作为本发明实施例的另一个优选方案，所述的植物为拟南芥，所述的抗性为对病原细菌Pst DC3000的抗病性。

本发明实施例的另一目的在于提供一种稻曲病菌效应蛋白在提高拟南芥的活性氧含量中的应用，所述的稻曲病菌效应蛋白是通过上述的宿主细胞表达得到的。

本发明实施例的另一目的在于提供一种稻曲病菌效应蛋白在提高拟南芥的胼胝质含量中的应用，所述的稻曲病菌效应蛋白是通过上述宿主细胞表达得到的。

作为本发明实施例的另一个优选方案，稻曲病菌效应蛋白的应用包括以下步骤：将浓度为0.01～0.05μmol/L的稻曲病菌效应蛋白溶液喷施在拟南芥的叶片。

与现有技术相比，本发明实施例的有益效果是：

本发明实施例通过将体外表达得到的稻曲病菌效应蛋白喷施在拟南芥叶片后，可以显著提高拟南芥中的活性氧和胼胝质含量，以及可以提高拟南芥对病原细菌Pst DC3000的抗病性，其为提高植物抗性和诱导植物防御反应提供了新的途径，在农业生产上具有广阔的应用前景。

附图说明

图1为pET-32a载体的图谱。

图2为实施例3和对比例1处理得到的拟南芥叶片在UV下的观察图。

图3为实施例3和对比例1处理得到的拟南芥叶片经胼胝质沉淀检测的结果对比图。