[发明专利]一种轨道再生型DNA步行器及应用有效
申请号: | 201911235388.2 | 申请日: | 2019-12-05 |
公开(公告)号: | CN110904100B | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 姜玮;逄寒;徐晓文 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/682 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 张晓鹏 |
地址: | 250100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 轨道 再生 dna 步行 应用 | ||
1.一种轨道再生型 DNA 步行器,其特征在于,所述 DNA 步行器由金纳米颗粒表面连接至少一条步行链及若干条路基链;所述步行链及路基链均为单链 DNA,步行链的一端与金纳米颗粒连接,另一端为通过封闭链封闭;所述路基链的一端与金纳米颗粒连接;所述轨道再生型 DNA 步行器还包括补充组件路轨链及核酸外切酶,所述路轨链为发卡结构,其5’凹末端和 3’端分别修饰荧光基团和猝灭基团。
2.如权利要求 1 所述轨道再生型 DNA 步行器,其特征在于,所述金纳米颗粒的直径为 10~20nm。
3.如权利要求 1 所述轨道再生型 DNA 步行器,其特征在于,所述金纳米颗粒:步行链:路基链的比例为0.8~1.2:8~12:180~220。
4.如权利要求 1 所述轨道再生型 DNA 步行器,其特征在于,所述步行链与路基链为硫醇化的 DNA 单链。
5.如权利要求 1 所述轨道再生型 DNA 步行器,其特征在于,所述路轨链的浓度范围为小于等于 1 μM。
6.权利要求 1-5任一项所述轨道再生型 DNA 步行器的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:将硫醇化的路基链及被封闭的步行链加入金纳米颗粒溶液中在室温条件下摇动一段时间。
7.如权利要求 6 所述轨道再生型 DNA 步行器的制备方法,其特征在于,将步行链和封闭链的混合物在 85~95℃中加热 8~12 分钟,然后缓慢冷却至室温。
8.如权利要求 6 所述轨道再生型 DNA 步行器的制备方法,其特征在于,所述金纳米颗粒:被封闭链锁定的步行链:路基链的比例为 0.8~1.2:8~12:180~210。
9.如权利要求 6 所述轨道再生型 DNA 步行器的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括:摇动完成后,向混合物中加入 tween-20 摇动一段时间之后, 再向混合物中缓慢加入 NaCl 继续摇动。
10.如权利要求9所述轨道再生型 DNA 步行器的制备方法,其特征在于,所述 tween-20 的浓度为 0.8~1.2%。
11.如权利要求9所述轨道再生型 DNA 步行器的制备方法,其特征在于,所述 NaCl的添加速度为 6 小时内缓慢添加 2 M NaCl;采用 PBS洗涤最终混合物。
12.权利要求 1-5任一项所述轨道再生型 DNA 步行器在制备核酸生物传感器中的应用。
13.一种核酸生物传感器,其特征在于,所述传感器采用权利要求 1-5任一项所述轨道再生型 DNA 步行器进行信号放大。
14.一种核酸检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括权利要求 1-5任一项所述轨道再生型 DNA 步行器。
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