[发明专利]固体支持物包被产物及其制备方法、应用和产品

说明书

本发明涉及免疫检测领域，具体而言，提供了一种固体支持物包被产物及其制备方法、应用和产品。本发明提供的固体支持物包被目标分子的方法，能减少固体支持物与目标分子的不正确偶联，提高有效偶联效率；能减少包被过程所用试剂对目标分子结构和稳定性的影响；提高包被产物的稳定性。应用本发明的包被产物能够改善免疫检测的性能指标。

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，具体而言，涉及一种固体支持物包被产物及其制备方法、应用和产品。

背景技术

固体支持物又称固相载体或固相，在免疫检测中，固体支持物上包被有允许特异性结合的部分，以实现目的检测物的捕获与分离。固体支持物的材质例如是塑料(如聚苯乙烯、聚氯乙烯)、衍生化的塑料、磁性或非磁性金属、玻璃或硅，固体支持物的构型例如微粒、珠子、试管、微孔滴定板、比色皿、膜、支架分子、薄膜、滤纸、圆盘或芯片。目前免疫检测中常用的固相支持物有磁性微球(磁珠)、微孔滴定板、硝酸纤维素膜、聚苯乙烯胶乳等。

以磁性微球为例，它是一种均匀、具有超顺磁性及保护性壳的球形小粒子，基本上由载体微球和配基结合而成。其核心为顺磁性粒子，核心外层包裹一层高分子，最外层是配基，配基的作用是与目标分子上的活性基团进行偶联，实现目标分子在固相载体上的包被。通常目标分子为特异性结合对成员之一，特异性结合对例如抗原和抗体，生物素或其衍生物和抗生物素蛋白或其衍生物，碳水化合物和凝集素，互补的核苷酸序列、效应物和受体分子、辅因子和酶、酶抑制剂和酶，地高辛和地高辛配基。以双抗体夹心法检测抗原为例，在磁性微球上包被抗体，通过加入含抗原的待测样本，可检测标记物标记的抗体，形成磁性微球-抗体-待检抗原-抗体-可检测标记物复合物，此复合物在外加磁场的作用下发生定向移动，从而达到分离和检测待检抗原的目的。

此外，磁珠的制备通常是在磁珠最外层偶联上功能基团如羟基(-OH)、氨基(-NH₂)、醛基(-CHO)、羧基(-COOH)、甲苯磺酰基、巯基(-SH)、硅基等，再与目标分子的基团进行偶联；常用的磁珠包被方法包括物理吸附、共价偶联、亲和偶联、蛋白A/蛋白G定向偶联等方法。其中，物理吸附是通过静电吸附，疏水作用等分子间作用力将抗体固定在磁珠表面；共价偶联是通过特定的化学试剂对抗体蛋白或固相表面官能团进行处理，通过共价键将抗体固定在基底表面；亲和偶联最经常应用的是链霉亲和素-生物素体系，将链霉亲和素与磁珠共价偶联，再与生物素标记的抗体形成复合物；蛋白A/蛋白G定向偶联是利用蛋白A和蛋白G能够特异性结合蛋白Fc端，将蛋白A或蛋白G偶联到磁珠上。

然而，不管是哪种偶联方式，固体支持物与目标分子偶联后，可能会出现某些性能不理想的问题，如临床特异性差、包被产物稳定性差、CV值高(如跳孔)等等，所以，提高包被产物性能具有重要意义。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种固体支持物包被目标分子的方法。

本发明的第二目的在于提供上述方法得到的包被产物。

本发明的第三目的在于提供包被产物在制备免疫诊断试剂中的应用。

本发明的第四目的在于提供含有本发明提供的包被产物的试剂盒。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种固体支持物包被目标分子的方法，将目标分子与惰性蛋白共包被在固体支持物上，得到包被产物。

例如所述惰性蛋白包括牛血清白蛋白、血蓝蛋白、卵清蛋白、酪蛋白、组蛋白、脱脂奶粉、多聚赖氨酸、明胶或胰蛋白胨。

进一步地，所述目标分子包括特异性结合对的成员之一，所述特异性结合对包括抗原和抗体，生物素及其衍生物和抗生物素蛋白及其衍生物，碳水化合物和凝集素，互补的核苷酸序列，效应物和受体分子，辅因子和酶，酶抑制剂和酶，或者，地高辛和地高辛配基。