[发明专利]可特异性结合sST2的结合蛋白、试剂和试剂盒

说明书

本发明公开了一种可特异性结合sST2的结合蛋白、试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域，本发明公开的结合蛋白包括抗原结合结构域；抗原结合结构域包括如下互补决定区中的至少一个：CDR‑VH1、CDR‑VH2、CDR‑VH3、CDR‑VL1、CDR‑VL2和CDR‑VL3；该结合蛋白可以特异性结合sST2，具有较好的结合活性和亲和力，可用于sST2的检测，以及用于以sST2为标志物的相关疾病的诊断，有利于提高检测的特异性和灵敏度，为sST2的检测提供多种蛋白选择。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种可特异性结合sST2的结合蛋白、试剂和试剂盒。

背景技术

生长刺激表达基因2蛋白(ST2)是白细胞介素1(IL-1)受体超家族成员之一，1987年Tominaga等人在小鼠成纤维细胞中首次发现了ST2；2002年哈佛大学医院附属妇女医院Richard Lee报道心肌应激以及心肌损伤会引起ST2的表达；2005年，Schmitz等研究者发现ST2基因不仅参与炎症反应和免疫性疾病的病理过程中，而且发现ST2基因的特异功能性配体IL-33；2013年美国ACC/AHA心力衰竭指南以及2014中国心力衰竭诊断和治疗指南根据ST2临床研究数据积累将sST2(可溶性ST2)引入心肌纤维化即心力衰竭的生物标志物的推荐之中。

生长刺激表达基因2蛋白(ST2)也被称为T1、IL1RL1或Fit1，其基因并且位于人的2q12号染色体上，约40KD，ST2基因的转录产物有4种亚型，其中有两种由于受到不同的启动子调控的亚型最为重要:第一种为跨膜ST2(ST2L)，由3个细胞外免疫球蛋白G结构域、一个跨膜结构域和一个细胞内结构域组成，是白细胞介素-1受体家族的膜受体成员；另外一种为可溶性ST2(sST2)，sST2由于缺乏跨膜和细胞内结构域，所以可以在血液中自由流动，使其可在血清中检测到。

生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的研究表明其与心功能障碍有关，ST2L受体具有心脏保护作用，和特异性配体IL-33结合后能够减少心脏心肌细胞的纤维化和肥厚性负担结构，减轻心肌梗死后心肌损伤程度，心肌细胞凋亡、炎症性心肌活化、心肌不良重构等病理症状。Kakkar等人发现活细胞的机械拉伸可以增强胞浆小泡中IL-33的释放，能够诱导由于体积或压力超载原因而使心脏重构IL-33，血管收缩素II能够通过产生多种活性氧(ROS)对心脏造成损害，而IL-33通过阻断血管收缩素II或苯肾上腺素对心肌的作用而发挥抗心肌肥厚作用，并且ST2L和IL33结合后活化核转录因子NF-kB以及促分裂原活化蛋白激酶MAPK通路，导致靶细胞释放Th2类细胞因子IL-4、IL-5，这些细胞因子能够发挥抗心肌肥大心肌纤维化的作用，从而启动修复保护作用。同样发现IL-33体外给药可增强ST2L的活化及其自身细胞内的生化通路，以及减少由血管收缩素II诱导的ROS生成，从而预防或至少减轻心脏临床和结构状态的恶化；

sST2作为IL-33的诱骗受体，是心血管疾病的标志物，与IL-33结合后阻断了阻止1L-33/ST2L信号通路，从而降低了IL-33与肌膜受体相互作用的有效性，在机械负荷过重的心肌细胞中，sST2被明显诱导，因此，心衰的发生或既往慢性心衰状态的恶化、心肌梗死诱发伤痕使心肌不能很好地伸展，这些病症都可以通过测量血液sST2水平检测到情况。Weinberg等人的研究表明，心肌梗死造成血浆中sST2水平的升高。因此，sST2的升高可降低IL-33对心肌细胞的保护作用，并可对总体心血管风险状况产生负影响。