[发明专利]一种巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备方法及应用

说明书

本发明涉及巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备方法及应用，可有效解决巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备，及在制备基于细胞膜包裹的仿生抗肿瘤药物和光热治疗药物中的应用问题。解决的技术方案是，中空三硒化二铋纳米粒表面物理负载抗肿瘤药物槲皮素，与细胞经低渗裂解液和裂解处理、匀浆得到的细胞膜囊泡共挤压，即得细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的药物组合物，粒径为120‑150nm，本发明制备工艺简单可行，粒径分部均匀，增强癌细胞对光热的敏感性，增强光热治疗的抗肿瘤效果，同时具有针对转移病灶的靶向能力和CT成像等多种功能，提高药物的抗肿瘤疗效。

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备方法及应用。

背景技术

光热疗法(Photothermal therapy, PTT)作为一种有效的癌症治疗方案，由于其在癌症治疗中的热疗作用，以及它在提高其他治疗方案如化疗和光动力疗法的治疗效率方面的关键作用，已经变得相当有吸引力。特别是成像引导的PTT，在一个纳米系统中可以同时监测和杀死肿瘤，由于其方便性、选择性、远程控制和高效率，引起了科学界的广泛研究关注。近年来，基于铋的纳米粒不仅可作为x射线计算机断层成像造影剂，还可作为增敏剂增强PTT治疗癌症。中空介孔三硒化二铋纳米粒(Bi₂Se₃ NPs)具有生物相容性好、化学稳定性高、光热转换能力强，比表面积大和多重成像等优点。

尽管PTT具有诸多优点，但在PTT的过程中由于热休克蛋白(hot shock proteins,HSPs)的上调，经PTT处理的肿瘤细胞可以迅速获得耐热性，提高肿瘤细胞的存活率和抗应激能力。槲皮素（quercetin, QE）是一个经典的蛋白激酶B (Akt)抑制剂，可通过下调p-Akt/MMP-9信号通路防止肿瘤的入侵和转移，同时促进凋亡蛋白Cas-3的表达增加肿瘤细胞的凋亡。不仅如此，槲皮素还可以有效减少HSP70的表达，显著提高PTT 的抗肿瘤疗效。

目前,绝大多数的微纳米运输载体不具有主动生物靶向能力,虽然可以通过肿瘤区域增强的渗透和滞留效应到达肿瘤,但这些运输载体也会在正常细胞附近聚集,杀死癌细胞的同时也杀死了正常细胞,具有一定的毒副作用。表面化学修饰虽然能够提高微纳米运输载体的生物靶向能力,但是修饰后的微纳米载体依然无法避免机体免疫清除。较低的肿瘤靶向能力、抗免疫清除能力、血液循环能力等严重限制了微纳米载体在生物医学领域的应用。近年来，细胞膜仿生纳米粒的研究为抗肿瘤药物的递送提供了新思路。细胞膜包裹纳米粒是将细胞膜包覆在纳米颗粒表面所制备而成的一种新型药物递送载体和仿生纳米材料。其表面的细胞膜完整地从细胞分离而来，从而在纳米颗粒的基本特性上进一步结合和发挥了细胞膜的复杂生物功能。巨噬细胞膜仿生的纳米粒在制备抗肿瘤递药系统方面可具有优秀的免疫逃避属性, 长循环能力和主动靶向特性，尤其是针对转移病灶等多种功能。因此，发明一种细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的药物递送系统应用在癌症治疗中具有重大意义和价值，但至今未见有公开报导。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备方法及应用，可有效解决巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备，及在制备基于细胞膜包裹的仿生抗肿瘤药物和光热治疗药物中的应用问题。

本发明解决的技术方案是，一种巨噬细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的制备方法，利用天然来源的巨噬细胞膜包被的纳米粒，包载难溶性药物，通过巨噬细胞膜表面的内源性生物大分子在体内对肿瘤区域释放的趋化因子、信号分子的主动识别作用，招募至肿瘤区域，从而增加药物在肿瘤组织的蓄积，发挥抗肿瘤疗效；通过肿瘤组织的慢性炎症病理特征释放的趋化因子与巨噬细胞膜表面的生物大分子相互作用，招募巨噬细胞膜包被的纳米粒向肿瘤组织主动募集，增加载药制剂在肿瘤的蓄积，同时增强肿瘤细胞对光热治疗的敏感性，提高治疗效果。据此本发明解决的技术方案是，中空三硒化二铋纳米粒表面物理负载抗肿瘤药物槲皮素，最后与细胞经低渗裂解液和裂解处理、匀浆得到的细胞膜囊泡共挤压，即得细胞膜仿生三硒化二铋纳米粒的药物组合物，粒径为120-150nm，具体包括以下步骤：