[发明专利]一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法

说明书

本发明提供了一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法，包括以下步骤：1)、碱醇热溶与趁热过滤；2)、酸沉与过滤；3)、亲脂性有机溶剂脱脂脱色；4)、制备薄层色谱法分离；条件是步骤3)脱色后所得的沉淀粗品中，谷维素的含量为70‑80wt％。本发明的特征在于以谷维素含量10～20％的皂脚为原料，采用特定前处理提纯步骤得到谷维素的含量为70‑80wt％的产品，再用制备薄层色谱法分离制备单体物质；制备所得的5种单体——24‑亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯、环木菠萝烯醇阿魏酸酯、环木菠萝醇阿魏酸酯、菜油甾醇阿魏酸酯、β‑谷甾醇阿魏酸酯纯度大于90％；单体可用作含量测定的对照品，外标法计算含量和定性峰位标定。

技术领域

本发明属于植物提取分离技术领域，涉及一种制备谷维素中5种主要阿魏酸酯单体的方法。

背景技术

谷维素(Oryzanol)存在于米糠油中，系以三萜(烯)醇为主体的阿魏酸酯的混合物。主要是环木菠萝醇的同系物(环木菠萝醇、环木菠萝烯醇、2,4-亚甲基环木菠萝烯醇，环米糠醇等)和甾醇类同系物(谷甾醇、豆甾醇等)。工业产品谷维素中各类阿魏酸酯的组成非常复杂，而且它们化学结构，理化性质非常相似，一般化学方法难以分离纯化。

谷维素主要由环木菠萝醇类阿魏酸酯和甾醇类阿魏酸酯组成。

1、环木菠萝醇类阿魏酸酯在谷维素中含量大约为75％～80％。主要组成及占比：(1)24-亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯，含量35％～40％；(2)环木菠萝烯醇阿魏酸酯，含量25％～30％；(3)环木菠萝醇阿魏酸酯，含量8％～10％；(4)环米糠醇阿魏酸酯，含量2％～3％；(5)24-甲基环木菠萝醇阿魏酸酯；(6)24-甲基环木菠萝醇烯醇阿魏酸酯；(7)25-氧基环木菠萝醇阿魏酸酯；(8)25-羟基甲基环木菠萝醇阿魏酸酯。

2、甾醇类阿魏酸酯在谷维素中含量大约为15％～20％。主要组成及占比：(1)菜油甾醇阿魏酸酯，含量为10％～12％；(2)β-谷甾醇阿魏酸酯，含量6％～8％；(3)豆甾醇阿魏酸酯，含量为1％～2％；(4)γ-谷甾醇阿魏酸酯，含量极微；(5)二氢-γ-谷甾醇阿魏酸酯，含量极微；(6)二氢-β-谷甾醇阿魏酸酯。

液质联用色谱法对单体成分进行归属的基础：以相关化学基团的分子量为基准，阿魏酸(194.2)、环木菠萝醇(428.7)、菜油甾醇(400.7)、β-谷甾醇(414.7)；当醇与酸结合生成酯以后，总分子量为二者分子量之和去掉一个水分子量18.0；各成分的分子量相差明显。对应24-亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯617.9、环木菠萝烯醇阿魏酸酯602.9、环木菠萝醇阿魏酸酯604.9、菜油甾醇阿魏酸酯576.9、β-谷甾醇阿魏酸酯590.9。

目前国内外普遍采用紫外-可见分光光度法(UV)测定谷维素含量。主要原因：(1)谷维素是环木菠萝醇类阿魏酸酯和甾醇类阿魏酸酯组成的混合物，具体成分有十多种，UV法可以一次测定这些同类物质；(2)虽然国内外有文献公开了采用高效液相色谱法(HPLC)测定谷维素含量，并以几种主要组成成分来确定谷维素的含量，但相应的标准品因为量少而稀有，价格昂贵，导致HPLC法的成本远高于UV法。

UV法测定谷维素含量，虽然简单，但是此法适用性有限，即对高含量谷维素的含量测定结果准确，但对于谷维素含量在40％以下的来自米糠油的皂脚、含谷皂基等的含量测定偏差大；只能测定同类物质的总含量，而不能测定谷维素中具体单一成分的含量；受杂质影响巨大，即虽然不是同类物质，但在相同检测波长条件下有强吸收的物质的影响极其显著，测定结果的不可控因素多，容易受掺杂物的影响而无法鉴定，无法保证产品质量。因此，该法的科学性欠缺。HPLC法具有科学性和严谨性，是世界公认的标准检测方法，但此法需要标准品，且来自谷维素的阿魏酸酯类标准品昂贵，导致此法不易普及。同时这些阿魏酸酯类和药物生产也同样需要高纯度的产品作为标准对照品，对药物品质控制有着重要意义。