[发明专利]一种高效低耗的喜树组织培养和移栽方法

权利要求书

1.一种高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述方法包括组培喜树苗步骤、炼苗移栽至蛭石步骤、移栽至育苗杯步骤、移栽至大田建立叶用园步骤；

所述炼苗移栽至蛭石步骤为：移栽前，每苗加10-15mL自来水，置于室内自然光下炼苗5-7天后，用自来水清洗苗根部的培养基，再将其移栽至蛭石，蛭石从小钵底部吸取自来水至饱和，每3-5天从小钵底部补充自来水一次，培养21-28天。

2.根据权利要求1所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述移栽至育苗杯步骤为：育苗杯装入1/3-1/2的田土，田土从育苗杯底部吸取自来水至饱和，将苗连蛭石移栽至育苗杯，再加田土至育苗杯满后从育苗杯底部补充自来水，每3-5天从育苗杯底部补充0.5％尿素的自来水溶液一次，培养28-35天。

3.根据权利要求2所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述移栽至大田建立叶用园步骤为：将育苗杯中苗移栽至室外或田间炼苗5-7天，移栽时除去育苗杯，再将苗带土直接移栽至大田，移栽规格0.45-0.50m×0.45-0.50m，施用喜树专用肥料，建立喜树叶用园。

4.根据权利要求3所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述组培喜树苗步骤包括外植体消毒和预培养、单株无菌苗培养、丛生芽诱导和培养、诱导不定根和壮苗培养；

所述诱导不定根和壮苗培养为：切取生长到2-3cm带有2-3片幼叶的无根丛生芽，接入到生根和壮苗培养基：WPM培养基+萘乙酸0.05mg/L+吲哚丁酸0.5mg/L+蔗糖25g/L，诱导生根和壮苗28-35天。

5.根据权利要求4所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述丛生芽诱导和培养为：将单株无菌苗切成1.5-2.0cm的小段，每段1-2个腋芽，保留1-2片叶子，接入到丛生芽诱导培养基：WPM培养基+6-苄氨基嘌呤0.5mg/L+蔗糖30g/L，诱导28-35天。

6.根据权利要求5所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述单株无菌苗培养为：选取成活的茎段，在超净工作台内，切取茎段叶腋处长出的新枝，接入到继代培养基：WPM培养基+吲哚乙酸0.1mg/L+吲哚丁酸0.5mg/L+蔗糖30g/L，培养28-35天。

7.根据权利要求6所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：所述外植体消毒和预培养为：选取喜树新发枝条，将其横切成2-2.5cm的小段，每段带1-2个腋芽，作为外植体进行消毒，消毒方法为：先用自来水冲洗，然后在超净工作台内，用70％的酒精浸泡，再用无菌水冲洗-0.1％升汞浸泡-无菌水冲洗，晾干，切除0.1％升汞接触过的切口，接入到初始培养基：MS培养基+萘乙酸0.1mg/L+蔗糖30g/L，置于光照培养室预培养21-28天。

8.根据权利要求7所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：培养基用水均为自来水。

9.根据权利要求8所述高效低耗的喜树组织培养和移栽方法，其特征在于：人工光照均为LED光照，光照强度为1000-1500lx，每天光照12h。