[发明专利]一种猫乳快速繁殖的方法

说明书

本发明涉及一种猫乳快速繁殖的方法，主要通过外植体的选择及消毒、继代增殖培养、生根培养以及炼苗移栽的步骤，特别是在灭菌和继代过程中，采用的合适的灭菌时间，改变激素浓度比例达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高的优良效果。

技术领域

本发明涉及猫乳类植物的繁殖方法，特别是一种猫乳的快速繁殖方法。

背景技术

猫乳属鼠李科猫乳属植物，又名鼠矢枣、长叶绿柴、山黄、七里头，在我国广泛分布，主要生长于山坡，山谷灌丛中。为落叶灌木或小乔木，为药用植物，具有补脾益肾，疗疮之功效。在山东威海地区，猫乳叶片可用于制茶，春季采摘幼嫩叶片后进行炒制而成的猫乳茶汤色金黄，入口绵香，久泡不变色，同时该茶还具有补脾强肾的功效。目前猫乳茶已经作为一种威海特有的天然野生茶开始引起饮茶爱好者的注意。

猫乳植株为多年生灌木，生长缓慢，短期内要形成大规模的生产困难较大，同时由于是近期挖掘的野生资源，目前市场上根本无种苗供应。而且种子繁殖可能会引起优良性状变异。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过组织培养对猫乳植物进行快速繁殖，为大规模种植提供坚实基础的猫乳快速繁殖的方法。

本发明的技术解决方案是：

一种猫乳快速繁殖的方法，其特征在于：包括：

（1）外植体的选择及消毒：于4-5月选晴朗天气直接在山间取猫乳植株上幼嫩茎段做为外植体，先用自来水冲洗表面浸泡3h，用洗衣粉水浸泡80min，再用自来水冲洗到基本无泡沫，冲洗干净后用剪刀剪去叶片后，放进超净台上的三角瓶中，首先用70 %的酒精溶液浸泡30 sec，无菌水冲洗4-6次，再用0.1%的HgCl₂浸泡10-12 min，最后用无菌水冲洗6-8次每次3-5 min；

（2）接种培养：取将步骤（1）所述的外植体，在超净台内切成3-4cm的带节小段，下部斜切，茎段插入到接种培养基中，每瓶只接一段，培养温度为25±1℃，16 h/d的光周期，光照强度 600 Lx左右，培养30天茎上腋芽开始长出幼嫩小芽长，所述接种培养基为MS＋6-BA2.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L+蔗糖30g/L，pH5.5-6.0；

（3）继代培养：将不污染的带有新营养芽的外植体转入第一继代培养基中使芽增殖，所述第一继代培养基是MS+6-BA 4.0mg/L＋NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L，继代5-7次左右，转入第二继代培养基或不添加任何激素的空白培养基中继代一次。然后重新继代，按照第一代培养基MS+6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L +蔗糖30 g/L。每5-7次重新循环；每一块外植体经过5-7次继代后均可一分为二但不超过3次；

（4）生根培养：将继代培养得到的小芽直接转入生根培养基中，培养温度为23±1℃，12h/d的光周期，光照强度 600 Lx，所述生根培养基为1/2 MS+ NAA 0.3 mg\L+蔗糖20g/LpH6.2，20天生根，当根生长到3 cm出瓶，根生长过长或生根时间过长都会影响移栽成活；

（5）炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4 d，然后解开封口膜，炼苗6d，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的基质中，温度控制在24-26℃，前7d湿度控制在70%，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下，炼苗移栽期间适当遮光，使光照强度为自然光的50%。

步骤（4）中所述小芽直径小于0.5mm；所述较大的芽直径0.5mm以上。

步骤（5）所述的基质为蛭石与黑土1:1混合。

本发明的有益效果是：