[发明专利]纳米抗体基因修饰的间充质干细胞及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种含有、和/或表达、和/或分泌纳米抗体的间充质干细胞。

2.如权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞含有纳米抗体基因、和/或含有1个或多个纳米抗体基因的核酸构建体、和/或含有1个或多个纳米抗体基因的重组载体。

3.如权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞来自骨髓、脂肪、脐带、脐带血、胎盘、滑膜、肌肉、肺、胰腺、肝脏、羊膜或者体细胞诱导而成的间充质干细胞；优选来自脂肪；

所述重组载体为病毒载体或非病毒载体，优选为非病毒载体。

4.如权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述抗体为特异性结合肿瘤抗原的抗体；优选地，所述抗体特异性结合选自以下的肿瘤抗原中的一种或多种：EGFRvIII、间皮素、GD2、Tn抗原、sTn抗原、Tn-O-糖肽、sTn-O-糖肽、PSMA、CD97、TAG72、CD44v6、CEA、EPCAM、KIT、IL-13Ra2、leguman、GD3、CD171、IL-11Ra、PSCA、MAD-CT-1、MAD-CT-2、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR-β、SSEA-4、叶酸受体α、ERBB、Her2/neu、MUC1、EGFR、NCAM、肝配蛋白B2、CAIX、LMP2、sLe、HMWMAA、o-乙酰基-GD2、叶酸受体β、TEM1/CD248、TEM7R、FAP、豆荚蛋白、HPV E6或E7、ML-IAP、CLDN6、TSHR、GPRC5D、ALK、聚唾液酸、Fos-相关抗原、中性粒细胞弹性蛋白酶、TRP-2、CYP1B1、精子蛋白17、β人绒毛膜促性腺激素、AFP、甲状腺球蛋白、PLAC1、globoH、RAGE1、MN-CA IX、人端粒酶逆转录酶、肠羧基酯酶、mut hsp 70-2、NA-17、NY-BR-1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、NY-ESO-1、GPR20、Ly6k、OR51E2、TARP、GFRα4和呈递在MHC上的这些抗原中任一者的多肽片段，以及CD5、CD10、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD24、CD25、CD27、CD30、CD34、CD37、CD38、CD40、CD53、CD69、CD72、CD73、CD74、CD75、CD77、CD79a、CD79b、CD80、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD86、CD123、CD135、CD138、CD179、CD269、Flt3、ROR1、BCMA、FcRn5、FcRn2、CS-1、CXCR4、CXCR5、CXCR7、IL-7/3R、IL7/4/3R和IL4R；或

所述抗体为免疫检查点抑制剂，优选选自PD-1抗体、PD-L1抗体、CTLA-4抗体、LAG-3抗体、TIM-3抗体、TIGIT抗体和VISTA抗体中的一种或多种。

5.含有权利要求1-4中任一项所述的间充质干细胞的细胞培养物或该细胞培养物的提取物，其中，所述提取物至少含有纳米抗体。

6.如权利要求5所述的细胞培养物或提取物，其特征在于，所述提取物取自所述细胞培养物中的间充质干细胞的内部或取自所述细胞培养物的上清液。

7.权利要求1-4中任一项所述的间充质干细胞或其细胞培养物或权利要求5或6所述的提取物在制备肿瘤免疫治疗用的药物或试剂盒中的用途。

8.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有权利要求1-4中任一项所述的间充质干细胞、和/或权利要求5或6所述的细胞培养物、和/或该细胞培养物的提取物，和/或药学上可接受的载体或赋形剂。

9.权利要求1-4中任一项所述的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括：将含有纳米抗体基因的重组载体转染至间充质干细胞内，并培养转入了所述重组载体的间充质干细胞的步骤；优选地，所述转染方法为化学转染或电穿孔转染。

10.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求1-4中任一项所述的间充质干细胞、或权利要求5或6所述的细胞培养物或提取物。