[发明专利]基于IL-15/IL-15Rα的缀合物的纯化方法

权利要求书

1.一种用于制备包含来自样品的单体缀合物的组合物的方法，所述缀合物包含：

a)包含白细胞介素15或其衍生物的氨基酸序列的多肽，和

b)包含IL-15Rα的sushi结构域或其衍生物的氨基酸序列的多肽；

其中，所述方法包括阴离子交换色谱、然后是疏水相互作用色谱对所述样品的应用，其中所述样品对应于表达所述缀合物的转化的宿主细胞的培养基样品，所述宿主细胞对应于选自包含CHO细胞、HEK293细胞、COS细胞、细胞、SP2O细胞、NSO细胞或源于它们的任何细胞的组的哺乳动物细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述宿主细胞为CHO细胞。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述方法包括如下步骤：

a)使所述样品经受阴离子交换色谱(AEX)以产生第一洗脱液；和

b)使所述第一洗脱液经受疏水相互作用色谱(HIC)以产生第二洗脱液。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述阴离子交换色谱(AEX)的步骤a)采用选自包含以下的组的AEX柱或树脂完成：Q Sepharose、DEAE Sephadex A-25、DEAESephadex A-50、QAE Sephadex A-25、QAE Sephadex A-50、Sourse 15Q、Sourse 30Q、Resourse Q、Cepto Q、Capto DEAE、Mono Q、Toyopearl Super Q、Toyopearl DEAE、Toyopearl QAE、Toyopearl Q、Toyopearl GigaCap Q、TSKgel SuperQ、TSKgel DEAE、Fractogel EMD TMAE、Fractogel EMD DEAE、Fractogel EMD DMAE、Macroprep High Q、Macro-prep-DEAE、Unosphere Q、Nuvia Q、POROS HQ、POROS PI、DEAE Ceramic HyperD、QCeramic HyperD、DEAE Sepharose Fast Flow和ANX Sepharose 4 Fast Flow。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述Q Sepharose选自包含以下的组：Q SepharoseFast Flow、Q Sepharose XL、大珠子Q Sepharose、高效Q sepharose、Q sepharose XL。

6.根据权利要求4所述的方法，其中所述Fractogel EMD TMAE为Fractogel EMD TMAEHiCap。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中对于使所述样品经受阴离子交换色谱(AEX)的步骤a)，上样步骤在具有等于或大于7.0的pH、优选地等于或大于7.5的pH的缓冲溶液中进行。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中对于使所述样品经受疏水相互作用色谱(HIC)的步骤b)，上样步骤在含有铵盐、优选地含有硫酸铵的缓冲溶液中进行。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中对于使所述样品经受疏水相互作用色谱(HIC)的步骤b)，上样步骤通过将所述第一洗脱液与上样缓冲液直接在所述色谱上混合来实现。

10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括将获得的缀合物用于制备药剂的步骤。

11.一种能够通过权利要求1至10中任一项所述的方法获得的药物组合物，所述组合物包含至少80％的单体缀合物。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其中所述缀合物的多肽a)和多肽b)是在融合蛋白中共价连接的。