[发明专利]一种测定土壤微生物趋化性芯片的制备方法有效
申请号: | 201911258118.3 | 申请日: | 2019-12-10 |
公开(公告)号: | CN110903960B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
发明(设计)人: | 吴金水;葛体达;王东东;祝贞科;魏晓梦;袁红朝 | 申请(专利权)人: | 中国科学院亚热带农业生态研究所 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 吕纪涛 |
地址: | 410125 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 土壤 微生物 化性 芯片 制备 方法 | ||
1.一种测定土壤微生物趋化性芯片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将含有微腔室、通道和混合区的芯片进行打印,得到光刻掩膜;
2)将光刻胶置于硅片中心后依次进行匀胶、第一烘干,得到匀好胶的硅片,将所述步骤1)得到的光刻掩膜与匀好胶的硅片的外边框对准后进行紫外曝光,得到曝光硅片,将所述曝光硅片进行第二烘干后用有机试剂PEGEMEA显影,再烘干坚模,得到阳模;
3)将PDMS预聚体和固化剂混合后,置于步骤2)得到的阳模上,静置后进行固化,得到PDMS印章;
4)将所述步骤3)得到的PDMS印章进行表面亲水化改性处理,得到处理印章,将趋化剂加入到处理印章的微腔室后,与载玻片贴合,得到测定土壤微生物趋化性芯片;
所述载玻片的表面经过亲水化改性处理;
所述步骤1)每两个微腔室通过一个通道进行连接,得到连接微腔室,每两个连接微腔室通过一个通道连接一个混合区;
所述微腔室的直径为2mm~3mm;
所述通道的直径为0.3mm~0.8mm;
所述混合区的长度为6mm~7mm,所述混合区的宽度为2mm~4mm。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)光刻胶包括光刻胶SU-8。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)匀胶包括:先800rpm~1000rpm处理5s~15s,再1200rpm~1800rpm处理20s~40s。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)第一烘干包括:先60℃~70℃处理10min~20min,再90℃~100℃处理1h~2h。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)紫外照射的时间为6~8s。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)第二烘干包括:先60℃~70℃处理4min~6min,再90℃~100℃处理40min~50min。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3)PDMS预聚体和固化剂的质量比为10~15:1。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3)静置的时间为15min~25min,所述固化的温度为60℃~70℃,所述固化的时间为2h~4h。
9.权利要求1所述的制备方法得到的芯片在测定土壤微生物趋化性中的应用,其特征在于,能够原位、定量和可视化测定土壤微生物趋化性。
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