[发明专利]一种微通道内构筑生物功能化的氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的方法

权利要求书

1.一种微通道内构筑生物功能化的氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的方法，包括：

(1)将玻璃毛细管用高锰酸钾溶液活化，得到已活化的微通道，将锌盐和氟盐的混合液与六亚甲基四胺溶液以相同的速度同时连续通入已活化的微通道内反应，处理，再同时连续通入锌盐溶液与六亚甲基四胺溶液继续反应，冲洗，烘干，得到内表面构筑有氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的微通道；

(2)将第一硅烷偶联剂溶液通入步骤(1)中内表面构筑有氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的微通道内，第一次孵育，冲洗，固化，再通入第二硅烷偶联剂溶液，第二次孵育，冲洗，然后通入N-马来酰亚胺丁酰氧基琥珀酰亚胺酯溶液第三次孵育，冲洗，再通入链霉亲和素溶液第四次孵育，冲洗，通入生物素化抗体第五次孵育，冲洗，得到生物功能化的氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的微通道。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中将玻璃毛细管用高锰酸钾溶液活化为：将玻璃毛细管浸入高锰酸钾溶液中，在70～100℃下停留30～90min，其中高锰酸钾溶液的浓度为0.1～50mM。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中锌盐包括硝酸锌、硫酸锌或乙酸锌；氟盐包括氟化铵或氟化钠；锌盐和氟盐的混合液中锌盐的浓度为0.01-1M，氟盐的浓度为0.01～1M，锌离子与氟离子的摩尔比为2:1～1:3；六亚甲基四胺溶液浓度为0.005-1M。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中将锌盐和氟盐的混合液与六亚甲基四胺溶液以相同的速度同时连续通入已活化的微通道内反应为：将锌盐和氟盐的混合液与六亚甲基四胺溶液以相同的速度同时连续通入已活化的微通道内，先在290～350℃下反应1～2min，然后在70～90℃下反应1～2h，或者直接在70～90℃下反应1～2h。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中处理温度为150～300℃，处理时间为30～60min；通入速度均为25～150μL/min；继续反应时间为30～120min。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中第一硅烷偶联剂溶液和第二硅烷偶联剂溶液浓度为1～10％v/v；第一硅烷偶联剂为3-氨丙基三乙氧基硅烷；第二硅烷偶联剂为3-巯基丙基三甲氧基硅烷；N-马来酰亚胺丁酰氧基琥珀酰亚胺酯溶液浓度为0.25～1mM；链霉亲和素溶液浓度为5～20μg/mL；生物素化抗体浓度为2.5～20μg/mL。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中第一次孵育为：室温孵育1～3h，然后50～60℃孵育0.5～1h；第二次孵育温度为室温，时间为6～10h；第三次孵育、第四次孵育和第五次孵育温度均为室温，时间均为20～60min。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中生物素化抗体包括：抗表皮生长因子受体anti-EGFR、抗上皮细胞粘附分子anti-EpCAM或抗细胞程序性死亡-配体1anti-PD-L1。

9.一种如权利要求1所述方法制备得到的生物功能化的氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的微通道。

10.一种如权利要求1所述方法制备得到的生物功能化的氟代氢氧化锌/氧化锌复合纳米林阵列的微通道在制备循环肿瘤细胞检测材料中的应用。