[发明专利]一种适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法

说明书

本发明公开了一种适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法。将肌腱组织放入固定液中固定后，转入保存液中保存，脱水渗透，石蜡包埋，切片即得所述肌腱组织石蜡切片；其中，所述保存液为乙醇、或乙醇和冰醋酸的混合物。该方法适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作，制备得到的鼠肌腱组织石蜡切片中鼠肌腱组织结构完整，肌腱细胞整齐排列，肌腱无断裂，获得了很好的切片效果，且成功率达到95％以上；另外，该鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法简便快捷，经济高效，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物组织制片技术领域。更具体地，涉及一种适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法

背景技术

肌腱是指肌肉末端的结缔组织纤维索，组织结构致密，比肌肉坚韧而体积小，由平行的胶原纤维束平行整齐紧密排列组成，束间有沿其长轴平行排列的肌腱细胞，肌腱没有收缩能力。此类致密的组织有髌韧带、跟腱等。肌腱形态学结构在创伤外科的肌腱病理损伤修复中是非常直观的检测指标；因此，肌腱组织切片是较常用的组织学方法。但是，由于肌腱组织结构比较致密，对液体的穿透阻力较大，组织本身呈现白色，触碰感觉偏硬，用常规的石蜡包埋制片时容易出现组织发白、切片时组织不成等情况，很难制出合格的肌腱组织石蜡切片。

目前，鄂群等(《中国修复重建外科杂志》，2007)利用改良4％多聚甲醛固定液(4％多聚甲醛液95mL+5mL冰醋酸)制备得到了合格的兔肌腱组织石蜡切片。但是，采用相同方法应用于鼠肌腱及髌韧带样本进行石蜡制片时，实际操作效果并不好，切片成功率低，切片时多出现组织发白、不成片的情况。可能是由于鼠肌腱及髌韧带的结构不同于兔肌腱，鼠肌腱、髌韧带组织小，肌束结构更加致密。因此，亟需研发一种切片效果好、成功率高、适用于制作鼠肌腱组织石蜡切片的方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有适用于鼠肌腱组织石蜡切片制作方法的空白，解决由于鼠肌腱组织结构致密，对液体的穿透能力较大，组织本身呈现白色，触碰感觉偏硬，用常规石蜡包埋制片时容易出现组织发白，切片时组织不成、成功率低的问题，提供一种适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法，将肌腱组织放入固定液中固定后，转入保存液中保存，脱水渗透，石蜡包埋，切片即得所述肌腱组织石蜡切片；其中，所述保存液为乙醇、或乙醇和冰醋酸的混合物。

尽管冰醋酸可以使组织膨胀，对于肌腱致密组织的制片能起到一定效果；但是，如果组织在体积分数大于5％冰醋酸的固定液中固定时间过久，会使组织过度膨胀，形态不好，染色偏浅。因此，本发明考虑到冰醋酸对组织的不良影响，创造性地提供了适用于鼠肌腱组织石蜡切片的制作方法，采用将鼠肌腱组织在含较高体积分数(5％～10％)冰醋酸的固定液中固定24～48h后，转入含较低体积分数(3％～7％)冰醋酸的保存液中，利于鼠肌腱组织石蜡切片的制作。

优选地，所述保存液为乙醇和冰醋酸的混合物。

更优选地，所述乙醇的体积分数为68％～72％。

更进一步优选地，所述乙醇的体积分数为70％。

更优选地，所述冰醋酸的体积分数为3％～7％。

更进一步优选地，所述冰醋酸的体积分数为5％。

优选地，所述保存的时间为1～30d。

更优选地，所述保存的时间为1d。

优选地，所述固定液为多聚甲醛和冰醋酸的混合物。

优选地，所述多聚甲醛的体积分数为90％～95％，所述冰醋酸的体积分数为5％～10％。

更优选地，所述多聚甲醛的体积分数为90％，所述冰醋酸的体积分数为10％。

优选地，所述多聚甲醛的质量浓度为3％～5％。