[发明专利]一种葡萄糖的快速检测方法

说明书

本发明公开了一种葡萄糖的快速检测方法。本发明利用温和环保的方式制备具有高催化能力的纳米级GOxAuNCs@ZIF‑8复合物；所述GOxAuNCs@ZIF‑8复合物与AuNCs及GOX两种游离酶的均匀混合物相比，GOxAuNCs@ZIF‑8的生物催化级联增强约19.3倍，酶稳定性高，酶用量小，成本低，实现了对葡萄糖的高效、灵敏检测，而且检测条件温和、操作简便、靶向性强。解决了色谱法存在的样品预处理程序繁琐和仪器昂贵；电化学法存在的靶向性差，传感器稳定性差，需要特殊的电极及电化学设备；传统酶法比色传感器成本高，酶用量多，酶易于失活等问题。

技术领域

本发明涉及糖类分析检测技术领域，具体涉及一种葡萄糖的快速检测方法。

背景技术

血清中葡萄糖含量是衡量人体健康状态的一个重要指标，土壤中葡萄糖含量是衡量土壤特性的常用指标，污水中葡萄糖指标对污水净化具有重要作用，食品与药品中葡萄糖含量更是成分分析常用的指标，因此，葡萄糖检测技术在医学、生物技术、土壤检测、工业废水处理、食品及药品加工领域被广泛使用。开发操作简便，高灵敏度的葡萄糖检测技术已成该领域的关注重点。

目前检测葡萄糖的方法主要有比色法、电化学方法、高效液相色谱法等，其中：高效液相色谱法样品预处理程序繁琐、仪器昂贵，成本高；电化学法是近年来应用最多的的葡萄糖检测技术，具有操作简便、线性范围宽及灵敏度高的特点，但电化学法对检测物的选择性较差，需要特殊的电极和电化学仪器辅助检测，大多数电化学传感器的储存期较短，成本相对较高。

与电化学法相较，比色法具有成本低、显色时间短、现象明显、条件稳定、方便快捷，不需要特殊的电极和电化学仪器等突出优势，在分析检测领域中占据着越来越重要的地位。比色化学传感器是运用紫外-可见分光光度计或者光电比色计，以朗伯比尔定律为理论基础，确定样品中待测物质含量的一种简便的分析方法。比色化学传感器大致分为两类：一类是目视比色化学传感器，也就是人们使用眼睛观察，找到与样品溶液颜色相近的标准溶液，从而方便快捷地确定样品中待测物质的含量范围，但是由于人眼的分辨率不高，容易受到不同环境的影响，因此此种方法的准确度相对较低。另一种是分光光度法，利用物质在特定波长处吸光度的大小，根据朗伯比尔定律确定待测物质的含量大小，此种方法相对于目视比色法有较高的准确度。

葡萄糖氧化酶法(GOX法)测定葡萄糖特异性强，检测时间短，环境友好，样品用量少，是比色法测定葡萄糖比较常用的方法。但所需葡萄糖氧化酶及过氧化物酶存活的条件较为苛刻，需要低温保存在一定浓度的PBS溶液中，长时间暴露在室温或者较高温度下，酶会以较快的速度失活分解，阻碍了酶的反复利用，而且葡萄糖氧化酶价格昂贵、制备复杂，GOX法测定葡萄糖的酶用量多，检测成本较高。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种葡萄糖的快速检测方法，实现了对葡萄糖的高效、灵敏检测；有效解决了葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖所存在的酶用量多、酶易失活等问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供一种GOxAuNCs@ZIF-8复合物，所述GOxAuNCs@ZIF-8复合物由如下方法制备而成：

将醋酸锌溶液、葡萄糖氧化酶(GOx)溶液、金纳米簇(AuNCs)溶液和2-甲基咪唑溶液按体积比为(3-5)：(3-5)：(3-5)：(3-5)混合，搅拌1-3min，然后静置10-16h；离心洗涤，制备得到GOxAuNCs@ZIF-8复合物。

优选的，所述醋酸锌溶液的浓度为0.03-0.05mol/L；所述葡萄糖氧化酶溶液的浓度为0.4-0.6mg/mL；所述金纳米簇溶液的浓度为0.6-0.9mg/mL；所述2-甲基咪唑溶液的浓度为0.13-0.17mol/L。

优选的，所述金纳米簇溶液由如下方法制备而成：