[发明专利]一种麻栎组培苗生根及炼苗方法

说明书

一种麻栎组培苗生根及炼苗方法，属于植物组织培养技术领域，所述方法包括如下步骤：1）生根苗的选择；2）生根介质及营养配方；3）炼苗的程序方法。本发明提供一种可以实现麻栎规模化生产的生根炼苗方法，增加侧根数量，降低生根介质及药品的成本，简化炼苗程序，提高驯化移栽成活率。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种麻栎组培苗生根及炼苗方法。

背景技术

麻栎(Quercus acutissima Carr.)属壳斗科落叶乔木，是柞蚕的主要饲料树种之一，具有耐干旱、耐瘠薄，抗白粉病、早烘病的特点，其叶质含干物质总量多（碳水化合物含量高），故收蚁结茧率高，是建设秋用保苗场的优良树种，其放养柞蚕茧的茧层量、全茧量、茧层率等指标均为最高。

目前我国用于养蚕的部分柞园沙化、退化严重，据调查，辽宁地区用于养蚕的柞园53万公顷，其中约16万公顷退化，亟需大量优质柞苗，进行生态柞园修复，但柞树橡种虫害危害率超过60%，导致柞苗繁育工作事倍功半，为满足退化柞园生态修复的市场需求，目前麻栎试管苗快繁已进行了较多研究。廖婧（2012），Okamura 等（2001），Kim等（1997）相继进行了麻栎体细胞胚胎发生与快速繁殖技术研究，均获得了再生植株，但未获得生根苗。于艳（2014），以5年生植株当年生枝条为外植体获得了瓶内生根苗，最佳生根培养基为： 1/4MS(2 倍铁盐)+ 0. 5 mg/L NAA，培养基中浓度为20g/L，琼脂浓度为6.0g/L，pH为5.4，培养2周即开始生根，根长且侧根数量多，幼苗的生根率最高达到 74.0%。赵丹（2010）以种子萌发幼苗为外植体获得了瓶内生根苗，最佳生根培养基为：1/2MS+NAA0.5 mg/L，蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为5.4g/L，pH5.8，生根率87%，根数量多，但无侧根。当试管苗根生长至3~4cm时，将封口膜打开，在培养室内炼苗3天，再移至温室内炼苗2天，取出小苗，洗去培养基，移栽到基质上。

组培苗长期在弱光、恒温、高湿（瓶内的湿度是100%）的环境下生长，叶片表面无角质、蜡质，气孔不能关闭，极易失水萎蔫，光合作用能力极低，试管苗的移栽是一个从异养到自养的过程，为了适应移栽后的较低湿度和较强光照，需要逐渐打开瓶口适应外界环境。炼苗时需逐渐打开瓶口，目前常采用反复揭开、盖上封口膜的方法，或先把封口膜开一半，过几天再全开的方法，操作相对较繁琐，成本较高，无法实现规模化生产。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提出了一种麻栎组培苗生根及炼苗方法，解决麻栎组培苗侧根数量少，炼苗程序繁琐，且移栽清洗过程中根部受损率高，导致移栽成活率低的问题。提供一种成本低，可以实现麻栎规模化生产的生根炼苗方法。

本发明采用如下技术方案：

1、一种麻栎组培苗生根及炼苗方法，：所述方法包括如下步骤：

选择继代周期在4次以上的带4-5片叶，株高在3-5cm的继代苗切割成单芽，植株基部距离基部第一片叶距离0.3-0.6 cm，剪掉基部1-2片叶，插到生根培养基中，所述生根培养基为改良1/2WPM+吲哚丁酸（IBA）0.4mg/L+芸苔素3-5 ml/L，支持物为麻栎锯末和珍珠岩体积比2：3，深度在1-2cm，而后用带孔眼的聚丙烯塑料膜封口第一层，再用密封的聚丙烯塑料膜封口第二层；

培养12-15天容器底部能观察到根时，根长1.5-2.5cm，将培养瓶转移到炼苗室，揭掉第二层封口膜进行炼苗，炼苗室湿度在60%以上，温度20-25℃，3-5天后揭开第一层封口膜炼苗2天即可移栽，移栽时拔出生根苗直接移栽到基质中。

进一步地，所述方法还包括前一周培养环境为光照2500-3000lx，7天后根原基形成转入光照3000-3500lx的环境中培养，每天光照12小时，温度23-25℃。