[发明专利]一种磷酰胆碱吗啉中磷酸胆碱杂质的高效液相色谱检测方法

说明书

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种磷酰胆碱吗啉中磷酸胆碱杂质的高效液相色谱检测方法。样液中性酰胺基键合相色谱柱分离，乙腈和pH＝2.5的甲酸水溶液等度洗脱，蒸发光检测器检测。本方法简单便捷，可快速测定磷酰胆碱吗啉及磷酸胆碱含量，具有较高的准确性、稳定性和分离度。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种磷酰胆碱吗啉中磷酸胆碱杂质的高效液相色谱检测方法，尤其是涉及一种中性酰胺基键合相色谱柱分离、蒸发光检测器检测的高准确性、稳定性和分离度的磷酰胆碱吗啉中磷酸胆碱杂质的高效液相色谱检测方法。

背景技术

胆碱类药物主要是针对胆碱受体、乙酰胆碱酯酶而开发的药品，分为拟胆碱药物、抗胆碱药物两大类。拟胆碱药物可用于青光眼、肠麻痹、血管痉挛性疾病等治疗；抗胆碱药物可用于抢救感染中毒性休克，解除有机磷农药中毒，阿斯综合症和内脏绞痛，也可用于麻醉前给药、散瞳或治疗角膜炎、虹膜炎等。

磷酰胆碱吗啉是合成胆碱类药物的中间体，磷酸胆碱是合成磷酰胆碱吗啉的原料，因此不仅在生产前需要对两种物质进行质量控制，而且在生产后也要监控其是否残留。目前没有相关检测方法，因此亟需开发磷酰胆碱吗啉中磷酸胆碱杂质的检测方法。

由于磷酰胆碱吗啉和磷酸胆碱均为强极性化合物，且结构相近，因此在C18色谱柱上保留很小，并且无法达到很好的分离度，即使通过调整流动相种类、比例、pH值等均无法达到较高的分离效果。亲水色谱柱是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性化合物保留行为的色谱技术，利用亲水作用色谱原理，可保留或分离强极性、水溶性化合物，具有较高的重新性和寿命。本方法采用中性酰胺基键合相的亲水色谱柱，通过调整流动相，使磷酰胆碱吗啉和磷酸胆碱达到较好的分离效果。

本方法操作简单，可快速测定磷酰胆碱吗啉及磷酸胆碱含量，具有较高的准确性、稳定性和分离度。

发明内容

本发明的目的是提供一种较高准确性、稳定性和分离度的高效液相色谱检测，经中性酰胺基键合相色谱柱分离、蒸发光检测器检测，可实现磷酰胆碱吗啉中磷酸胆碱杂质含量的快速测定。

为了实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：试样经纯水或甲醇溶解并定容，过膜后注入高效液相色谱仪，在设置仪器条件下采集色谱图，外标法定量；其中，设置仪器条件为中性酰胺基键合相色谱柱分离，柱温35℃，体积比为70/30的乙腈和pH＝2.5的甲酸水溶液为流动相等度洗脱，柱流量0.5mL/min，进样体积10μL，蒸发光检测器检测。

有益效果：本发明采用中性酰胺基键合相色谱柱分离，蒸发光检测器检测，可快速测定磷酰胆碱吗啉及磷酸胆碱含量，具有较高的准确性、稳定性和分离度，且方法简单便捷。

附图说明

图1标准溶液的高效液相色谱图

具体实施方式

结合实施例对本发明做进一步说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所做出的任何变更或改进，均属于本发明的保护范围。

实施例一

采用的高效液相色谱仪，配蒸发光检测器检测器。

精密称取磷酰胆碱吗啉、磷酸胆碱各0.1g(精确0.001g)，用水溶解并定容至100mL。采用的色谱条件为：Venusil HILIC色谱柱；35℃柱温；乙腈和pH＝2.5的甲酸水溶液为流动相等度洗脱且体积比为70/30；0.5mL/min流速；10μL进样体积；蒸发光检测器检测。将标品溶液过膜后注入高效液相色谱仪，记录色谱图。10.34min为磷酸胆碱谱峰，8.86min为磷酰胆碱吗啉谱峰，保留时间适宜且分离度高，峰形对称性良好。