[发明专利]一种与小麦抗白粉病基因Pm37连锁的分子标记及其应用有效
申请号: | 201911265034.2 | 申请日: | 2019-12-11 |
公开(公告)号: | CN110777218B | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 马朋涛;刘成;何华纲;杜文晓;贾梦淑;张旭;王文瑞 | 申请(专利权)人: | 烟台大学;山东省农业科学院作物研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 石家庄国域专利商标事务所有限公司 13112 | 代理人: | 苏艳肃 |
地址: | 264005 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小麦 白粉病 基因 pm37 连锁 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种扩增与小麦抗白粉病基因Pm37连锁的分子标记的引物,其特征在于,所述分子标记为YTURGA;所述分子标记YTURGA的上游引物为YTURGA-F,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述分子标记YTURGA的下游引物为YTURGA-R,其核苷酸序列如SEQ ID N:2所示;以所述分子标记YTURGA的上游引物和下游引物对小麦基因组DNA进行PCR扩增,将扩增产物电泳分离,获得对应的扩增产物分子量为296bp,即为与小麦抗白粉病基因Pm37连锁的分子标记。
2.一种权利要求1所述的扩增与小麦抗白粉病基因Pm37连锁的分子标记的引物在小麦抗白粉病基因Pm37的检测中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)从待测样品的幼嫩叶片提取小麦基因组DNA;
(2)利用分子标记YTURGA的上游引物和下游引物对所述提取的基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;
(3)PCR扩增产物检测:在质量百分比浓度为8%的变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳,将所述扩增产物和6μL上样缓冲液混合后,取2μL混合物点样,280V恒压下电泳3h,硝酸银染色后拍照,若能扩增出296bp的特异条带,说明待测小麦种质中存在抗白粉病基因Pm37,否则,待测小麦种质中不存在小麦抗白粉病基因Pm37。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增的体系为 10μL,包含30ng/μL小麦基因组DNA 1.0μL、10×PCR buffer 1.0μL、10mM dNTP 0.2μL、10mM MgCl2 1.0μL、5UTaq聚合酶0.2μL、5μM的上游引物0.4μL、5μM的下游引物0.4μL和无菌去离子水5.8μL;所述PCR扩增的程序为:94℃预变性8分钟;94℃变性30秒,57℃退火40秒,延伸40秒,36个循环;72℃延伸10min;4℃保存。
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