[发明专利]高亲和力AFPT细胞受体

说明书

本发明提供了一种高亲和力AFPT细胞受体，具体地，提供了一种T细胞受体(TCR)，其具有结合FMNKFIYEI‑HLA‑A*0201复合物的活性，并且所述T细胞受体包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，所述TCRα链可变域包含3个CDR区；并且所述TCR对所述FMNKFIYEI‑HLA‑A*0201复合物的结合亲和力是野生型TCR对FMNKFIYEI‑HLA‑A*0201复合物的结合亲和力的至少10倍。此类TCR可以单独使用，也可与治疗剂联用，以靶向呈递FMNKFIYEI‑HLA‑A*0201复合物肿瘤细胞。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及高亲和力AFPT细胞受体，更具体地涉及能够识别衍生自甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)抗原多肽的T细胞受体(T cell receptor,TCR)。本发明还涉及所述受体的制备和用途。

背景技术

仅仅有两种类型的分子能够以特异性的方式识别抗原。其中一种是免疫球蛋白或抗体；另一种是T细胞受体(TCR)，它是由α链/β链或者γ链/δ链以异二聚体形式存在的细胞膜表面的糖蛋白。免疫系统的TCR总谱的组成是在胸腺中通过V(D)J重组，然后进行阳性和阴性选择而产生的。在外周环境中，TCR介导了T细胞对主组织相容性复合体-肽复合物(pMHC)的特异性识别，因此其对免疫系统的细胞免疫功能是至关重要的。

TCR是呈递在主组织相容性复合体(MHC)上的特异性抗原肽的唯一受体，这种外源肽或内源肽可能会是细胞出现异常的唯一迹象。在免疫系统中，通过抗原特异性的TCR与pMHC复合物的结合引发T细胞与抗原呈递细胞(APC)直接的物理接触，然后T细胞及APC两者的其他细胞膜表面分子就发生相互作用，这就引起了一系列后续的细胞信号传递和其他生理反应，从而使得不同抗原特异性的T细胞对其靶细胞发挥免疫效应。

与TCR相对应的MHC I类和II类分子配体也是免疫球蛋白超家族的蛋白质但对于抗原的呈递具有特异性，不同的个体有不同的MHC，从而能呈递一种蛋白抗原中不同的短肽到各自的APC细胞表面。人类的MHC通常称为HLA基因或HLA复合体。

短肽FMNKFIYEI(SEQ ID NO:31)源自肝癌患者过表达的AFP。肿瘤细胞的Ⅰ型HLA分子呈递包括FMNKFIYEI在内的源自于AFP的短肽。因此，FMNKFIYEI-HLA-A*0201复合物提供了一种TCR可靶向肿瘤细胞的标记。能够结合FMNKFIYEI-HLA-A*0201复合物的TCR对肿瘤的治疗具有很高的应用价值。例如，能够靶向该肿瘤细胞标记的TCR可用于将细胞毒性剂或免疫刺激剂递送到靶细胞，或被转化入T细胞，使表达该TCR的T细胞能够破坏肿瘤细胞，以便在被称为过继免疫治疗的治疗过程中给予患者。对于前一目的，理想的TCR是具有较高的亲和力的，从而使该TCR能够长期驻留在所靶向的细胞上面。对于后一目的，则优选使用中等亲和力的TCR。因此，本领域技术人员致力于开发可用于满足不同目的的靶向肿瘤细胞标记的TCR。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对FMNKFIYEI-HLA-A*0201复合物具有较高亲和力的TCR。

本发明的再一目的是提供一种上述类型TCR的制备方法及上述类型TCR的用途。

本发明的第一方面，提供了一种T细胞受体(TCR)，其具有结合FMNKFIYEI-HLA-A*0201复合物的活性，并且所述TCR包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，所述TCRα链可变域包含3个CDR区，所述TCRα链可变域的3个CDR区的基准序列如下，

CDR1α：TSINN

CDR2α：IRSNER

CDR3α：ATDAEGTYKYI，并且含有至少一个下列突变：