[发明专利]一种酶-超滤法精制低分子硫酸皮肤素的工艺、应用

权利要求书

1.一种低分子量硫酸皮肤素，其特征在于，所述低分子量硫酸皮肤素的数均分子量为2000～5000Da；

所述低分子量硫酸皮肤素的重均分子量为2500～6500Da。

2.根据权利要求1所述的低分子量硫酸皮肤素，其特征在于，所述低分子量硫酸皮肤素的重均分子量的分子量分布为：

分子量小于2000Da的硫酸皮肤素占所述低分子量硫酸皮肤素全部的10wt％以下；

分子量大于8000Da的硫酸皮肤素占所述低分子量硫酸皮肤素全部的12wt％以下；

分子量为2000～8000Da的硫酸皮肤素占所述低分子量硫酸皮肤素全部的78wt％～90wt％。

3.根据权利要求1所述的低分子量硫酸皮肤素，其特征在于，所述低分子量硫酸皮肤素的重均分子量为3500～6000Da；

所述低分子量硫酸皮肤素的数均分子量为3000～4500Da；

所述低分子量硫酸皮肤素的比旋度小于等于-40°；

所述低分子量硫酸皮肤素的纯度为99％以上。

4.一种低分子量硫酸皮肤素的精制工艺，其特征在于，包括以下步骤：

1)将硫酸皮肤素溶液和硫酸软骨素B酶混合后，进行酶解后，得到料液；

2)向上述步骤得到的料液，加入强氧化剂进行氧化反应后，再经过过滤，得到滤后料液；

3)将上述步骤得到的滤后料液经过循环超滤后，得到低分子量硫酸皮肤素。

5.根据权利要求4所述的精制工艺，其特征在于，所述硫酸皮肤素溶液包括硫酸皮肤素水溶液；

所述硫酸皮肤素溶液的pH值为6.5～8.5；

所述硫酸皮肤素溶液的质量浓度为8％～12％；

所述硫酸皮肤素的重均分子量为15000～45000Da；

所述硫酸软骨素B酶与所述硫酸皮肤素溶液的体积比为0.001％～0.003％；

所述硫酸软骨素B酶的浓度为8000～12000IU/mL；

所述酶解的温度为35～37℃；

所述酶解的时间为3～5h。

6.根据权利要求4所述的精制工艺，其特征在于，所述强氧化剂包括高锰酸钾、高锰酸钠、过氧化氢和次氯酸钠中的一种或多种；

所述强氧化剂占所述料液的质量比为2％～5％；

所述氧化反应的温度为80～90℃；

所述氧化反应的时间为30～45分钟；

所述氧化反应后还包括静置降温步骤和/或除杂步骤；

所述过滤为微滤膜过滤；

所述微滤膜的孔径为0.1～0.45μm。

7.根据权利要求4所述的精制工艺，其特征在于，所述循环超滤前还包括稀释步骤；

所述稀释的滤后料液的质量浓度为3％～5％；

所述超滤为切向流超滤；

所述循环超滤的具体步骤为：

先采用第一超滤膜进行第一循环超滤后，收集透过液，再采用第二超滤膜进行第二循环超滤后，收集截留液；

所述第一超滤膜的过滤精度为8000～12000Da；

所述第一循环超滤的次数为100～500次；

所述第二超滤膜的过滤精度为800～1200Da；

所述第二循环超滤的次数为100～500次；

所述循环超滤后还包括后处理步骤。

8.根据权利要求7所述的精制工艺，其特征在于，所述后处理步骤包括溶解、沉淀、再溶解、过滤、冷冻干燥、研磨和混合中的一步或多步；

所述后处理步骤具体为：

将循环超滤后得到的截留液和氯化钠溶解后，再加入乙醇静置后，舍弃上清液，得到沉淀；

将上述步骤得到的沉淀再次溶解、冷冻干燥和磨粉后，得到成品低分子量硫酸皮肤素；

所述氯化钠与所述截留液体积比为2％～4％；

所述乙醇与溶解后的物料体积比值为(2～3)：1；

所述静置的时间为6～8h。