[发明专利]一种盐耐受性改良的木糖苷酶突变体K321DH328D及其应用有效
申请号: | 201911268812.3 | 申请日: | 2019-12-11 |
公开(公告)号: | CN110862976B | 公开(公告)日: | 2021-04-27 |
发明(设计)人: | 周峻沛;黄遵锡;张蕊;李娜;韩楠玉;唐湘华 | 申请(专利权)人: | 云南师范大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C02F3/34;C12R1/19 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 邹仕娟 |
地址: | 650500 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 耐受 改良 糖苷酶 突变体 k321dh328d 及其 应用 | ||
1.一种盐耐受性改良的木糖苷酶突变体K321DH328D,其特征在于,所述的突变体K321DH328D由木糖苷酶序列SEQ ID NO.3第321位的赖氨酸及第328位的组氨酸都突变为天冬氨酸得到,所述的突变体K321DH328D的氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示;所述盐耐受的盐为KCl、Na2SO4或Na2SO4。
2.权利要求1所述突变体K321DH328D的编码基因k321dh328d,其特征在于,所述的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO. 2所示。
3.一种重组载体,其特征在于,包含权利要求2所述的编码基因。
4.一种重组菌,其特征在于,包含权利要求2所述的编码基因。
5.权利要求1所述的木糖苷酶突变体K321DH328D的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)合成突变体K321DH328D的编码基因k321dh328d;
2)将1)中合成的序列和表达载体pEasy-E1相连接,即可获得包含k321dh328d的表达载体;
3)将连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达K321DH328D的重组菌株;
4)培养重组菌株,诱导木糖苷酶突变体K321DH328D表达;
5)回收并纯化所表达的木糖苷酶突变体K321DH328D。
6.权利要求1所述的突变体K321DH328D在农业、制革和污水处理中的应用。
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