[发明专利]超声辅助提取紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂的方法

说明书

本发明公开了一种超声辅助提取紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂的方法，包括如下步骤：将收获的紫苏叶自然晾干、去杂、粉碎，溶于乙醇水溶液中，在温度为30℃‑70℃的条件下超声提取10min‑50min后，离心过滤去除残渣，收集上清液，减压浓缩、冷冻干燥，将黄嘌呤氧化酶抑制剂粗品溶于去离子水中，配制成5‑20mg/mL的上样液，以2‑5BV/h流速上样，用5个柱体积的去离子水洗除杂质，用40％‑70％乙醇以1‑4BV/h流速进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、冷冻干燥，即得。本发明操作简单、效率高、成本低，且获得的黄嘌呤氧化酶抑制剂具有纯度高，抑制活性好等优点，为治疗痛风或高尿酸血症提供一定的理论和技术支撑。

技术领域

本发明涉及天然植物提取领域，具体涉及一种超声辅助提取紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂的方法。

背景技术

高尿酸血症及痛风是当今社会的常见病、多发病，至今无法根治。近年来痛风的发病率持续增长，且逐渐向低龄化发展。高尿酸血症是由遗传或后天因素引起的嘌呤代谢性疾病，是由人体内尿酸生成增加或排泄减少所导致，现已被定为心血管疾病的危险因子。高浓度血清尿酸对肾有直接伤害，可导致肾纤维化、肾衰竭，也可诱发高血压。当高尿酸血症患者体内的尿酸以钠盐的形式沉积在关节、软组织处，就会引起组织炎症进而导致痛风。因此，高尿酸血症是引发痛风的重要生化基础。

黄嘌呤氧化酶是一种复合性黄素蛋白酶，在核酸代谢中极其重要。它能催化次黄嘌呤生成黄嘌呤，再继续生成尿酸和自由基。因此，作为尿酸生成的关键酶，黄嘌呤氧化酶是减少尿酸生成的重要靶点，其中黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤生成尿酸的关键位点是钼蝶呤中心。

在临床上，抑制黄嘌呤氧化酶的药物包括别嘌呤醇、奥昔嘌呤、非布司他、托匹司他、丙磺舒、苯溴马隆等。虽然别嘌呤醇一直是治疗痛风的典型药物，但其副作用大，对人体有严重伤害。因此，从天然产物中筛选出低副作用、高效的黄嘌呤氧化酶抑制成分成为研究治疗高尿酸血症及痛风的重要方向。

紫苏(Perilla frutescens(L.)Britt.)，属一年生草本植物，是中国卫生部首批颁布药食两用的中药之一。紫苏叶既可鲜食，也可用于治疗多种疾病，如镇咳、健胃、降血脂血压、增强记忆力、解表散寒、抑菌等。Kaufmann等研究表明，紫苏提取物在体外可抑制黄嘌呤氧化酶的活性，Wang等鉴定出紫苏提取物为有效的黄嘌呤氧化酶抑制剂。现阶段，国内外对从紫苏中提取黄嘌呤氧化酶抑制剂已有报道，但针对从紫苏叶中提取黄嘌呤氧化酶抑制剂的工艺尚未有深入详细的研究和报道。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种超声辅助提取紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂的方法，提取所得的黄嘌呤氧化酶抑制剂具有纯度高、抑制活性好等优点。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种超声辅助提取紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂的方法，包括如下步骤：

S1、原料预处理：将收获的紫苏叶自然晾干、去杂、粉碎、密封袋保存以备用；

S2、将紫苏叶粉末溶于浓度为30％-70％的乙醇水溶液中，在温度为30℃-70℃的条件下超声提取10min-50min，得提取液；

S3、将所得的提取液离心过滤去除残渣，收集上清液，减压浓缩、冷冻干燥，得紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂粗品；

S4、将黄嘌呤氧化酶抑制剂粗品溶于去离子水中，配制成5-20mg/mL的上样液，取大孔树脂，以2-5BV/h流速上样，用5个柱体积的去离子水洗除杂质，用40％-70％乙醇以1-4BV/h流速进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、冷冻干燥，得紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制剂纯品。

进一步地，所述步骤S1中，紫苏叶粉碎后需过20-100目筛。

进一步地，所述步骤S2中，所述紫苏叶与乙醇水溶液的料液比为1∶10-1∶50，超声提取的时间为10min。