[发明专利]一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法

说明书

本发明公开了一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法，本发明采用HPLC法，色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈(B)‑0.1％磷酸水溶液(A)；梯度洗脱；流速1.0mL/min；检测波长：258nm，柱温30℃；一测多评法以没食子酸为内参物，分别建立原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷和异槲皮苷的相对校正因子(RCF)，通过RCF计算其含量，并将其测定值与外标法测定结果进行对比分析，本发明提供的一测多评法与外标法测定结果并无显著差异(P＞0.05)，各相对校正因子重复性良好，本发明所建立的高效液相色谱含量测定及一测多评法可用于芒果止咳片中该6个成分的含量测定，且方法准确可靠，重复性好，可用于芒果止咳片的质量控制。

技术领域

本发明涉及中成药复方制剂成分检测技术领域，具体涉及一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法。

背景技术

芒果止咳片是由芒果叶干浸膏、鱼腥草素钠、马来酸氯苯那敏制成的中西药复方制剂，具有宣肺化痰、止咳平喘的功效，临床上用于治疗咳嗽、气喘、多痰等症。芒果止咳片长期以来得到广泛应用，并显示出良好的临床疗效。目前的质量标准是参照国家食品药品监督管理总局颁布的国家药品标准(2014)国标字-0154号文进行，该标准只有简单的理化鉴别方法，显然并不能有效控制该制剂的质量。近十多年来虽有一些用高效液相色谱单独测定芒果止咳片中芒果苷、鱼腥草素钠和马来酸氯苯那敏的文献报道，但中成药复方制剂成分复杂，单一成分定量测定难以全面控制其质量和疗效一致性，多指标成分测定已成为相关质量评价的发展趋势；现代药理学研究表明，芒果叶中含有的黄酮类及酚酸类化合物具有明显的平喘、止咳、祛痰、免疫、抗肿瘤等多种活性作用，为该制剂的功效相关成分；因此，本发明采用高效液相色谱法，研究建立了芒果止咳片中原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷多个成分的含量测定方法，并在此基础上，针对该制剂中一些如芒果苷、高芒果苷对照品价格较高，检测成本较高的问题，研究建立了这6个成分的一测多评测定方法。

发明内容

本发明目的在于提供一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法。本发明所建立的高效液相色谱一测多评法用于芒果止咳片中原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷6个成分的含量测定，方法准确可靠，重复性好，与外标法测定结果并无显著差异(P＞0.05)，本方法可为芒果止咳片的质量控制提供参考。

为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种花香型山茶籽油沐浴露的制备方法，包括下列步骤：

一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：分别取没食子酸、原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷和异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70％甲醇溶解，制成含没食子酸、原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷的质量浓度分别为1.830mg/mL、0.1010mg/mL、2.613mg/mL、0.3623mg/mL、0.1554mg/mL、0.07480mg/mL的混合对照品溶液，备用；

(2)供试品溶液的制备：取芒果止咳片20片，去糖衣，精密称定总片重，研细，取其粉末0.3g，精密称定，精密加入70％甲醇25mL，超声40min，滤过，残渣精密加入70％甲醇25mL，超声40min，滤过，合并滤液，水浴挥干，残渣加70％甲醇溶解，定容至10mL容量瓶，摇匀，13000r/min离心10min，取上清液作为供试品溶液；

(3)阴性供试品溶液的制备：按处方工艺制备缺芒果叶的阴性样品，取适宜的芒果叶阴性样品，并按步骤(2)制备得芒果叶阴性对照溶液；

(4)系统适应性试验：分别取混合对照品溶液、芒果止咳片供试品溶液和芒果叶阴性对照溶液，按一定的色谱条件进样分析测定，理论塔板数按金丝桃苷峰计算应不少于120000；