[发明专利]达匹维林在制备抑制鱼类病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种达匹维林的新用途，尤其是达匹维林在制备抑制鱼类病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的药物中的应用。旨在寻找对病毒性出血性败血症病毒有抗病毒活性的药物，可用于病毒性出血性败血症病毒感染的治疗。本发明通过研究发现达匹维林(Dapivirine)具有抑制病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的功能，在治疗病毒性出血败血症方面具有很好的效果。即达匹维林在制备抑制鱼类病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的药物中的应用。

技术领域

本发明涉及达匹维林的新用途，尤其是达匹维林在制备抑制鱼类病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的药物中的应用。

背景技术

病毒性出血性败血病(Viral hemorrhagic septicemia，VHS)是一种由病毒性出血性败血症病毒(VHSV)引起的烈性传染病，该病毒能够感染多种海洋和淡水鱼类，包括虹鳟、鲑鱼、大菱鲆等，引发严重的鱼类出血性败血症。VHS主要流行于欧洲，北美，日本及韩国，曾造成严重的经济损失，是出现疫情后必须向世界动物卫生组织汇报的水产疫病之一。

VHSV属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)。弹状病毒呈子弹状，长度约170-180nm，宽度约60-70nm，含包膜。病毒基因组为负链ssRNA，大小约11kb，编码5种结构蛋白：核蛋白(nucleoprotein、N)、聚合酶相关磷蛋白(polymerase-associated phosphoprotein、P)、基质蛋白(matrix protein、M)、糖蛋白(glycoprotein、G)和RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP、L)；第六个基因位于G和L之间，编码与发病机制有关的非结构蛋白(Nv)。VHSV可根据N和G基因的差别分成4个地理亚型：I、II、III、IV。

达匹维林(Dapivirine，TCM120)是一种非核苷逆转录酶抑制剂(nonnucleosidereverse transcriptase inhibitor，NNRTIs)，别称为TMC120，化学式为C₂₀H₁₉N₅，属于二芳基嘧啶化合物(DAPY)。达匹维林能够结合HIV逆转录酶的变构位点，使酶的构象改变而失活，从而抑制HIV-1的复制。目前，达匹维林主要作为杀微生物剂，被制成半固体凝胶、弹性硅胶两种剂型置于阴道环内，用于防止HIV的传播。达匹维林对包括A型和B型在内的多株流感病毒具有抗病毒活性，在感染初期抑制病毒核糖核蛋白进入细胞核，从而抑制病毒基因组的复制和蛋白合成。在肿瘤研究方面，达匹维林能够通过降低U87 GBM细胞对凋亡和自噬的抑制，导致JNK和PI3K/Akt通路的激活，来抑制胶质瘤细胞的活性。

目前，尚未有相关文献证实达匹维林具有抗VHSV活性。

发明内容

本发明旨在寻找对病毒性出血性败血症病毒有抗病毒活性的药物，可用于病毒性出血性败血症病毒感染的治疗。本发明通过研究发现达匹维林(Dapivirine)具有抑制病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的功能，在治疗病毒性出血败血症方面具有很好的效果。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案为：达匹维林在制备抑制鱼类病毒性出血性败血症病毒对细胞感染的药物中的应用。

作为本发明的一个实施例，达匹维林在制备抑制鱼类病毒性出血性败血症病毒对FHM细胞感染的药物中的应用。体外细胞毒性实验结果表明，达匹维林对FHM细胞的半数致死浓度CC₅₀是8.0μM，如图1所示；达匹维林对FHM细胞的保护实验结果表明，达匹维林的半数最大效应浓度EC₅₀为0.91±0.05μM，如图2所示。

作为本发明的一个实施例，达匹维林在制备抑制鱼类VHSV病毒对细胞感染的药物中的应用。本发明检测了达匹维林的抗VHSV感染的能力，药物在病毒感染前加入细胞、药物与病毒共同加入细胞、药物在病毒感染后加入细胞和药物与病毒共同孵育后加入细胞，24小时和36小时后细胞病变效应(CPE)均显著减少，细胞内病毒核酸的复制均显著下降，如图3、4所示。