[发明专利]一株分泌蛇形菌素单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用有效
| 申请号： | 201911272254.8 | 申请日： | 2019-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN110724192B | 公开（公告）日： | 2022-02-08 |
| 发明（设计）人： | 匡华;金国浩;胥传来;徐丽广;马伟;刘丽强;吴晓玲;宋珊珊;胡拥明 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K16/14 | 分类号： | C07K16/14;C12N5/20;C07K14/795;C07K1/107;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 时旭丹;张仕婷 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分泌 蛇形 菌素 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
1.一株分泌蛇形菌素单克隆抗体的杂交瘤细胞株OVA15，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为单克隆细胞株，保藏日期2019年10月14日，保藏编号CGMCCNo.18515。
2.蛇形菌素单克隆抗体，其特征在于：它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.18515的杂交瘤细胞株OVA15分泌产生。
3.权利要求2所述蛇形菌素单克隆抗体的应用，其特征在于：用于检测食品中蛇形菌素残留物。
4.根据权利要求3所述蛇形菌素单克隆抗体的应用，其特征在于：所述食品具体为谷物。
5.根据权利要求3所述蛇形菌素单克隆抗体的应用，其特征在于：检测方法为制备ELISA竞争法检测蛇形菌素的试剂。
6.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株OVA15，其特征在于：用于制备杂交瘤细胞株OVA15的蛇形菌素完全抗原的制备方法如下：
（1）蛇形菌素半抗原的制备：将蛇形菌素与琥珀酸酐反应引入活性羧基，得到蛇形菌素半抗原；
（2）蛇形菌素完全抗原的制备：将蛇形菌素半抗原溶解于N,N-二甲基甲酰胺溶液中，加入3倍蛇形菌素物质量的N-羟基琥珀酰亚胺NHS和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC，室温磁力搅拌反应6-8h，称为A液；将2000倍蛇形菌素物质量的血蓝蛋白KLH加入至磷酸盐缓冲液中，获得B液；将A液逐滴加入到B液中，室温反应过夜，经PBS溶液透析，除去未反应的小分子半抗原，获得蛇形菌素完全抗原。
7.根据权利要求6所述杂交瘤细胞株OVA15，其特征在于所述蛇形菌素半抗原的结构式如下：
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8.根据权利要求6所述杂交瘤细胞株OVA15，其特征在于所述蛇形菌素完全抗原的结构式如下：
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