[发明专利]一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法及应用

说明书

一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法及应用，属于动物分子遗传学技术领域。为了更准确方便地鉴定低脂肉鸡，加速肉鸡的育种过程，本发明根据鸡HBP1基因SNP位点g.‑4354TA上游337bp下游27bp序列设计引物，再根据所得引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，之后利用限制性内切酶对扩增产物进行强制性酶切，再对酶切产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，获得鸡腹脂标记基因型。本发明操作简单、费用低、精确度高，可进行自动化检测，是一种有效的分子标记育种手段，为鸡的标记辅助选择提供了科学依据，采用该方法可以加快鸡的育种进程，培育适合市场需求的低脂肉鸡，从而获得较好的经济效益。

技术领域

本发明属于动物分子遗传学技术领域，具体涉及一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法及应用。

背景技术

经过长期的选育，肉鸡的生长速度和产肉量得以明显提高，然而肉鸡育种却面临着新的挑战。伴随着快速生长，肉鸡生理性不适症及相关疾病明显增加，如体脂蓄积过多、腹水综合症、猝死症、腿部疾病、机体免疫功能下降等，这些问题给肉鸡生产者造成了巨大的经济损失。肉鸡体脂(尤其是腹脂)蓄积过多已成为一个突出的问题。肉仔鸡体内沉积过多的脂肪有诸多不利：(1)明显降低饲料转化效率，因为沉积单位重量的脂肪比沉积单位重量的瘦肉多消耗三倍的能量；(2)降低了胴体瘦肉对脂肪组织的比例，因而降低了分割肉产量；(3)加工者和消费者将肉仔鸡体内沉积的这些脂肪的很大一部分(腹脂垫、肌胃周围脂肪、嗉囔脂肪及肠系膜脂肪等)丢弃，这不仅增加了加工者和消费者的负担，而且增加了废物及处理水中的脂肪含量，从而污染了环境。由此看来，肉仔鸡体内沉积过多的脂肪将会给生产者、加工者和消费者造成显而易见的经济损失。肉种鸡过肥会严重影响产蛋率、受精率和孵化率，并且会诱导脂肪肝综合症(FLHS)的发生，从而加大了产蛋期的死淘率。因此，控制脂肪在鸡体内的过多蓄积，进一步提高肉鸡的饲料转化效率和胴体质量是亟待研究解决的重大问题。

哺乳动物中，脂肪形成是脂肪细胞数量增加和细胞体积变大的结果。脂肪细胞的数量取决于多能干细胞定向分化为前脂肪细胞的数量，而细胞体积变大取决于细胞分化程度和甘油三酯累积多少。鸡HBP1基因位于1号染色体，是一种转录抑制因子。目前为止，尚未发现有关HBP1基因分子标记对鸡腹部脂肪含量进行选择的报道。

发明内容

为了更准确方便地鉴定低脂肉鸡，加速肉鸡的育种过程，本发明提供了一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法，步骤如下：

1)根据鸡HBP1基因SNP位点g.-4354TA上游337bp和下游27bp序列设计引物，获得扩增引物；

2)利用步骤1)所得的扩增引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，获得扩增产物；

3)利用限制性内切酶对步骤2)所得的扩增产物进行酶切，获得酶切产物；

4)对步骤3)所得的酶切产物进行电泳分离，获得分离产物；

5)对步骤4)所得的分离产物进行基因型分析，获得鸡腹脂标记基因型。

进一步地限定，所述鸡腹部脂肪量，是指鸡的腹脂重和腹脂率。

进一步地限定，步骤1)所述扩增引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.2所示。

进一步地限定，步骤3)所述限制性内切酶，是限制性内切酶HinfI。

进一步地限定，步骤4)所述电泳分离采用聚丙烯酰胺凝胶，所述聚丙烯酰胺凝胶的浓度为14％。

进一步地限定，步骤5)所述基因型分析通过限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法，对扩增结果进行分析。