[发明专利]一种基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其中，所述试剂盒包括DNA1‑fSAA抗原偶联物、DNA2‑fSAA抗体偶联物、标记吖啶酯(AE)的DNA3和氧化石墨烯(GO)结合抗氧化剂(AOD)。利用本发明的试剂盒进行检测，其操作简单、结果准确、耗时短、精密度高，并且能够定量检测；样本无需稀释，不存在HOOK效应。

技术领域

本发明涉及化学发光免疫分析法技术领域，特别是涉及一种基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒。

背景技术

血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种主要的急性时相蛋白，除了在人体中存在，还发现在其他物种中，包括犬、猫和马等。由于猫CRP未表现出急性期蛋白的作用，与疾病程度不相关，猫SAA(fSAA)成为猫系统炎症敏感标志物的首选。炎症发生一开始SAA浓度显著上升，炎症消退时快速下降，能够实现早期诊断，判断感染程度。因此对猫SAA(fSAA)的研究具有重要的意义。

国内外有部分实验室研发出猫SAA(fSAA)的检测方法，例如酶联免疫吸附实验法，免疫比浊法，荧光免疫层析法等。ELISA由于其检测方法耗时耗力，所以该方法只适合实验室研究，不适合用于临床诊断。免疫比浊法受临床样本干扰因素影响大，结果不准确。荧光免疫层析法属于半定量检测，结果准确度不高。迫切需要精准、快速和定量的猫SAA(fSAA)检测产品，化学发光法是最好的选择，尤其是均相化学发光法。

由此可见，上述现有的猫SAA(fSAA)在检测方法与使用上，显然仍存在有不便与缺陷，而亟待加以进一步改进。为了解决猫SAA的检测方法中存在的问题，相关厂商莫不费尽心思来谋求解决之道，但长久以来一直未见适用的设计被发展完成，而一般方又没有适切的方法能够解决上述问题，此显然是相关业者急欲解决的问题。

有鉴于上述现有的猫SAA的检测方法中存在的缺陷，本发明人基于从事此类产品设计制造多年丰富的实务经验及专业知识，并配合学理的运用，积极加以研究创新，以期创设一种新的基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，能够改进一般现有的检测方法，使其更具有实用性。经过不断的研究、设计，并经反复试作及改进后，终于创设出确具实用价值的本发明。

发明内容

本发明的主要目的在于，克服现有的检测方法中存在的缺陷，而提供一种新的基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，所要解决的技术问题是使其检测结果精准、快速并且能够定量，从而更加适于实用，且具有产业上的利用价值。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

依据本发明提出的一种基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其中，所述试剂盒包括DNA1-fSAA抗原偶联物、DNA2-fSAA抗体偶联物、标记吖啶酯(AE)的DNA3和氧化石墨烯(GO)结合抗氧化剂(AOD)。

前述的基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其中，所述DNA1-fSAA抗原偶联物的浓度为1～5nM；所述DNA2-fSAA抗体偶联物的浓度为5～20nM；所述标记吖啶酯(AE)的DNA3的浓度为0.05～0.2μM；以及所述氧化石墨烯(GO)结合抗氧化剂(AOD)的浓度为20μg/ml。

前述的基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其中，所述DNA1-fSAA抗原偶联物的浓度为2.5nM；所述DNA2-fSAA抗体偶联物的浓度为10nM；所述标记吖啶酯(AE)的DNA3的浓度为0.1μM。

前述的基于均相化学发光免疫竞争法检测猫血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其中，所述DNA1含有54个碱基，3’端修饰NH2C7，通过偶联剂二(磺基琥珀)辛二酸(BS3)与fSAA抗原上的氨基共价结合，形成DNA1-fSAA抗原偶联物。