[发明专利]构建大鼠脑积水模型的外源激素及模型的构建方法

说明书

本发明涉及动物模型构建技术领域，特别涉及构建大鼠脑积水模型的外源激素及模型的构建方法，本申请采用注射外源激素的方法构建大鼠脑积水模型，整个方法相对于高岭土混悬液的皮穿刺注射法和显微镜直视下注射法操作起来更方便、简单；发明人在研究过程中发现，本申请的孕马血清促性素和人绒毛膜促性素两个激素可导致水通道蛋白AQP4表达的增加，从而引起液体渗透增多，形成积液，然而，由于AQP4水通道蛋白对于积液的影响是双向的，即可引起液体增多，也可引起液体消退，因此，激素的种类、注射程序、剂量显得尤为重要，采用本申请的制备方法制备大鼠脑积水模型是可靠可行的。

【技术领域】

本发明涉及动物模型构建技术领域，特别涉及构建大鼠脑积水模型的外源激素及模型的构建方法。

【背景技术】

脑积水/脑水肿是指循流于脑室的脑脊髓液因通路被出血阻碍无法顺流，以至液压使得脑干膨胀，压迫到挠度，从而引起脑部功能障碍的一种疾病，是脑出血后常见的并发症之一，具有很高的发病率，为了研究脑积水的治疗方案，现有技术中通过各样的动物来构建脑积水动物模型，最常用的动物有大鼠；但目前，各种模型与人类脑积水的相符程度究竟如何尚需进一步探讨，以更准确的将动物研究成果推及人类疾病的诊疗；现有技术中构建脑积水模型主要是从以下几个方面：①闭塞脑脊液通路，常用的方法有：通过注入高岭土诱导脑积水、根据术式可分为经皮穿刺注射法和显微镜直视下注射法，注入部位可选枕大池、基底池和皮质凸面蛛网膜下腔；注入自体血液诱导脑积水，该模型的制作机理近乎脑室出血后脑积水的发病机制，但是由于建模效率和稳定性不够，应用较少；注入硅橡胶诱导的脑积水，其作用机理和高岭土类似，但是由于硅橡胶常导致脑干受压而死亡率和致残率较高，故其应用也受到一定限制；注入氰基丙烯酸酯凝胶引起的脑积水，其作用机理也是诱发慢性梗阻性脑积水；但是由于费用昂贵，操作复杂，不利于普遍推广和大样本研究应用；还有通过其他可能的梗阻材料来闭塞脑脊液通路构建脑积水模型；②遗传学及基因干扰手段引起的脑积水；选育啮齿类动物尤其是鼠的基因突变品系获得先天性脑积水动物模型；但是选育方法虽然带有一定的定向性，但是由于基因调控机制的很复杂，更多的是具有不确定性，通过选育获得脑积水动物模型的概率很少；③通过病毒、细菌、细胞因子及致畸物等方法诱导脑积水动物模型。但这些因素诱导的脑积水动物模型，除了可引起脑积水外，其对脑组织的直接损害对观察脑积水病变结果会起到一定的干扰作用，其应用受到一定限制。

针对上述现有技术中存在的问题，如何简单、高效的构建脑积水动物模型是目前在脑积水疾病研究中必须要解决的技术问题。

【发明内容】

鉴于上述内容，有必要提供注射外源激素构建大鼠脑积水模型的方法，能简单、高效的构建脑积水动物模型。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

构建大鼠脑积水模型的外源激素，所述外源激素为孕马血清促性素和/或人绒毛膜促性素。

进一步的，所述孕马血清促性素的注射体积为0.2mL，含量为10IU；所述人绒毛膜促性素的注射体积为0.2mL，含量为10-30IU。

本发明还包括一种利用外源激素构建大鼠脑积水模型的方法，所述方法为：将大鼠分组后记为第0d；第1-4d，每天注射体积为0.2mL的孕马血清促性素10IU；第5d，注射0.2mL的人绒毛膜促性素10-30IU；得到大鼠脑积水模型。

进一步的，所述人绒毛膜促性素为30IU。

进一步的，所述大鼠周龄为3周龄、4周龄和/或5周龄。

进一步的，所述大鼠脑积水模型的鉴定方法为：注射人绒毛膜促性素后第48小时，对大鼠进行麻醉、注射伊文思蓝溶液后开颅，观察大鼠颅内染色情况。

进一步的，所述麻醉的方法为：腹腔注射45mg/kg的巴比妥。

进一步的，所述伊文思蓝溶液的浓度为5mmoL/L，注射量为0.2mL。

本发明具有如下有益效果：