[发明专利]奥利亚罗非鱼性染色体特异分子标记及基于该分子标记的遗传性别鉴定和单性鱼生产方法

权利要求书

1.一种超雌和全雄奥利亚罗非鱼的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.将奥利亚罗非鱼ZZ雄鱼与ZW雌鱼的交配后代进行雄性化处理，采用奥利亚罗非鱼遗传性别鉴定的分子标记方法，筛选出基因型为ZW的转化雄鱼；

B.将ZW转化雄鱼与ZW雌鱼交配，采用奥利亚罗非鱼遗传性别鉴定的分子标记方法，从后代中筛选出基因型为WW的超雌鱼；

C.ZW转化雄鱼与奥利亚罗非鱼ZW雌鱼交配后代进行雄性化处理，采用奥利亚罗非鱼遗传性别鉴定的分子标记方法，筛选出基因型为WW的转化雄鱼；或将基因型为WW的超雌鱼苗进行雄性化处理获得WW的转化雄鱼；

D.将WW超雌鱼与WW转化雄鱼交配，获得全WW超雌鱼；

E.将WW超雌鱼与尼罗罗非鱼YY雄鱼交配获得全雄WY后代；

所述奥利亚罗非鱼遗传性别鉴定的分子标记方法，包括以下步骤：

A.PCR扩增：剪取待测奥利亚罗非鱼的鳍条，提取基因组DNA；以所得基因组DNA为模板，分别采用SEQ ID NO.1所示的上游引物F1和SEQ ID NO.2所示的下游引物R1，以及SEQ IDNO.3所示的上游引物F2和SEQ ID NO.4所示的下游引物R2，进行PCR扩增，并将所得产物与奥利亚罗非鱼性染色体特异分子标记进行对比；

B.结果判断：从待测奥利亚罗非鱼的基因组DNA中仅扩增出Z染色体特异条带，则判断该待测奥利亚罗非鱼为遗传上的雄鱼，基因型为ZZ；从待测奥利亚罗非鱼的基因组DNA中仅扩增出W染色体特异条带，则判断该待测奥利亚罗非鱼为遗传上的超雌鱼，基因型为WW；从待测奥利亚罗非鱼的基因组DNA中既扩增出Z染色体特异条带，又扩增出W染色体特异条带，则判断该待测奥利亚罗非鱼为遗传上的雌鱼，基因型为ZW；

其中，所述的奥利亚罗非鱼性染色体特异分子标记，包括奥利亚罗非鱼Z和W染色体特异分子标记，它们的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5和SEQ IDNO.6所示。