[发明专利]一种基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒，其中，所述试剂盒包括DNA1‑cPL抗体1偶联物、DNA2‑cPL抗体2偶联物、标记吖啶酯(AE)的DNA3和氧化石墨烯(GO)结合抗氧化剂(AOD)。利用本发明的试剂盒进行检测，其操作简单、结果准确、耗时短、精密度高，并且能够定量检测。

技术领域

本发明涉及化学发光免疫分析法技术领域，特别是涉及一种基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒。

背景技术

犬急性胰腺炎是临床上对犬危害较大的一种内科疾病，急性胰腺炎发病急、病程短、临床症状严重、难以治愈，甚至导致死亡。有很多急性病例由于未得到确切的诊断，耽误治疗而发展为慢性或亚漫性胰腺炎。病情反复发作，给患犬带来极大的痛苦，也给犬主带来了很多麻烦。

现在国内外的兽医临床上，对急性胰腺炎的诊断主要是依靠体检和实验室诊断指标相结合的办法，但是大量的临床统计数据包括病史调查、光检查、超声检查等在内的体检方法对犬胰腺炎的诊断特异性和敏感性均不强，无法单纯通过这些方法建立对犬急性胰腺炎的准确诊断。在人医上现在有研究开始检测来源于胰腺的胰淀粉酶来进行检测，试验证实其对人急性胰腺炎的特异性增高，但是目前还没有见到对犬进行该项检测的效果评估报告，其具体特异性和敏感性还有待进一步证实。

而现在随着国内兽医对胰腺炎的了解加深和可用医疗资源的增多，在临床上使用脂肪酶进行胰腺炎筛查的比例逐渐增加。但是现在有兽医的研究结果称因为在犬的体内有很多不同的细胞会合成和分泌脂肪酶，而以往一直使用的化学催化检测法所测试的脂肪酶是来源于不同细胞的脂肪酶总和，因而在胰腺外的细胞出现病变时也可见到脂肪酶浓度升高，脂肪酶对犬急性胰腺炎的诊断特异性仅为50%左右。

目前，国内外公司已经研发出几种犬胰脂肪酶（cPL）的检测方法，例如酶联免疫吸附实验法（美国IDEXX），荧光免疫层析法（韩国Bionote）。IDEXX ELISA由于其需要显色观察结果，灵敏度不够；荧光免疫层析法属于半定量检测，结果准确度不高。迫切需要精准、快速和定量的犬胰脂肪酶（cPL）检测产品，化学发光法是最好的选择，尤其是均相化学发光法。

由此可见，上述现有的犬胰脂肪酶在检测方法与使用上，显然仍存在有不便与缺陷，而亟待加以进一步改进。为了解决犬胰脂肪酶的检测方法中存在的问题，相关厂商莫不费尽心思来谋求解决之道，但长久以来一直未见适用的设计被发展完成，而一般方又没有适切的方法能够解决上述问题，此显然是相关业者急欲解决的问题。

有鉴于上述现有的犬胰脂肪酶的检测方法中存在的缺陷，本发明人基于从事此类产品设计制造多年丰富的实务经验及专业知识，并配合学理的运用，积极加以研究创新，以期创设一种新的基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒，能够改进一般现有的检测方法，使其更具有实用性。经过不断的研究、设计，并经反复试作及改进后，终于创设出确具实用价值的本发明。

发明内容

本发明的主要目的在于，克服现有的检测方法中存在的缺陷，而提供一种新的基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒，所要解决的技术问题是使其检测结果精准、快速并且能够定量，从而更加适于实用，且具有产业上的利用价值。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

依据本发明提出的一种基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒，其中，所述试剂盒包括DNA1-cPL抗体1偶联物、DNA2-cPL抗体2偶联物、标记吖啶酯（AE）的DNA3和氧化石墨烯（GO）结合抗氧化剂（AOD）。

前述的基于均相化学发光免疫分析法检测犬胰脂肪酶的试剂盒，其中，所述DNA1-cPL抗体1偶联物的浓度为1～20nM；所述DNA2-cPL抗体2偶联物的浓度为1～20nM；所述标记吖啶酯（AE）的DNA3的浓度为0.05～0.2μM；以及所述氧化石墨烯（GO）结合抗氧化剂（AOD）的浓度为20μg/ml。