[发明专利]PP2CG1基因在调控拟南芥耐低温胁迫中的应用在审

专利信息
申请号: 201911277169.0 申请日: 2019-12-12
公开(公告)号: CN112980869A 公开(公告)日: 2021-06-18
发明(设计)人: 杨淑华;吕健;张晓燕 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/11;A01H5/00;A01H6/20
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 黄爽
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: pp2cg1 基因 调控 拟南芥 低温 胁迫 中的 应用
【权利要求书】:

1.PP2CG1基因在调控拟南芥耐低温胁迫中的应用,其特征在于,其中,PP2CG1基因为编码如下蛋白质(a)或(b)的基因:

(a)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;

(b)SEQ ID NO:1所示序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等功能的由(a)衍生的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述调控为负调控。

3.一种提高拟南芥耐冷性的方法,其特征在于,所述方法包括:利用基因工程手段,对拟南芥PP2CG1基因进行定点突变,使得该基因功能缺失,从而提高拟南芥的耐冷性;或者,

通过敲除或降低拟南芥PP2CG1基因的表达,从而提高拟南芥的耐冷性;

其中,所述PP2CG1基因的定义同权利要求1中所述。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,针对拟南芥中的目标基因PP2CG1设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列,将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas的载体中,转化拟南芥,实现对拟南芥基因PP2CG1的定点突变,进而获得该基因功能缺失的转基因拟南芥植株。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,sgRNA作用位点的核苷酸序列为5’-CACTGCTTGTGAGGTGCCT-3’和5’-CACAAGCAGTGCTACTAGG-3’。

6.根据权利要求3-5任一项所述方法获得的拟南芥在植物育种中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,育种目的是选育耐低温型植物。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,育种方法包括转基因、杂交、回交、自交或无性繁殖。

9.PP2CG1基因打靶载体,其特征在于,所述打靶载体是以拟南芥PP2CG1基因为靶点设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列,将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas的载体中构建得到的;

其中,所述PP2CG1基因的定义同权利要求1中所述;

sgRNA作用位点的核苷酸序列为5’-CACTGCTTGTGAGGTGCCT-3’和5’-CACAAGCAGTGCTACTAGG-3’。

10.靶向编辑PP2CG1基因的CRISPR/Cas9系统在提高拟南芥耐冷性中的应用,其中,所述PP2CG1基因的定义同权利要求1中所述。

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